Libro de Resumen

-Resumen: The Center for Genetic Engineering and Biotechnology has a wide portfolio of biomedical and agricultural products/projects. The projects are characterized by being innovative and having intellectual property granted in Cuba, United States, European Union and other countries around the World. This Portfolio has been the subject for negotiations based on business models comprising patent licenses, technology transfers, founding of companies as Joint Ventures. More recently, the incubation of projects in R&D Centers or Technology Parks has been chosen as new alternatives in order to increase Project value. The results of both modalities with CIGB Projects in the territories of China and Russia have resulted in successful cases, generating new shared patents, as well as propelling the transition of projects from the early stages to demonstration of proof of concept and the pharmaceutical development to entry into non-clinical and clinical research.

-Palabras claves: Techno – Parks; R&D Centers

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-Resumen: La presentación resume los pasos y estrategias realizadas en Colombia para consolidar al FCErh como el único producto biotecnológico disponible para el tratamiento perilesional e intralesional de las ulceras de pie diabético complicado y otras úlceras complejas por su acción directa sobre su fisiopatología

-Palabras claves: consolidación
Colombia
estrategias
FCErh
ulceras
complejas

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: China tiene una amplia cooperación con BioCubaFarma en los campos de los productos biofarmacéuticos, los plaguicidas y los medicamentos veterinarios.
En marzo de 2016, Shandong Lukang Biopesticida, una empresa del Grupo Shandong Lukang Pharmaceuticals, y Heber Biotec (CIGB y BCF) establecieron la empresa conjunta: Shandong Lukang Heber Biotechnology, con un objeto social dirigido a productos en el campo agrícola.
China ha entrado en una fase de desarrollo de alta calidad y ha fortalecido, alentado y esta reorientando sus producciones hacia productos de alta gama, la producción de altos estándares de calidad y el uso de productos seguros y respetuosos con el medio ambiente. Todo esto va acompañado de aumento de la normativa y de la supervisión del cumplimiento.
El producto líder es HeberNem, un bionematicida seguro, eficiente y respetuoso con el medio ambiente. Este desarrollo es el tipo de productos que encaja muy bien en el concepto de entorno ecológico en China y en el mundo. Hasta la fecha, Lukang Heber ha obtenido el Registro Sanitario como Biofertilizante, ha completado la transferencia de tecnología y la industrialización de HeberNem en China. Por lo tanto, contamos con capacidades de producción y la posibilidad de satisfacer las demandas del producto. Se introduce en varios territorios de China y se está trabajando para extender y consolidar su uso en programas de manejo para controlar las infestaciones de nemátodos y aumentar los rendimientos. Ha demostrado su eficacia en pepinos, tomates, pimientos, plátanos, melones, guayaba, zanahoria, acelgas, lechugas y otros cultivos, del 20 al 60% dependiendo del cultivo y el manejo del campo.
Actualmente, la Empresa Mixta Lukang Heber ha obtenido 14 certificados de registro de agentes microbianos y fertilizantes microbianos compuestos, macro elementos y micro elementos, productos que ya se producen y comercializan en China bajo el aval del Ministerio de Agricultura de ese país.
Lukang Heber, desarrolla e introduce productos en el mercado, integra y promueve tecnologías de prevención ecológica y prioriza el ajuste estructural, la producción ecológica, y la innovación tecnológica hacia productos de origen biológico.
Busca impactar con productos que brinden soluciones a los grandes desafíos de aumentar la producción con un enfoque amigable con el medio ambiente. Reduce el uso de productos químicos tóxicos y el impacto negativo en la salud, humana y ambiental, integrados en el concepto y enfoque de Una Salud.
Actualmente, la empresa está trabajando para ampliar el alcance dentro del Grupo Lukang para otros productos en el campo biomédico. Los socios buscan aprovechar sus fortalezas, instalaciones de producción con altos estándares y experiencia en el desarrollo de moléculas innovadoras contra enfermedades de alta incidencia. Podemos tener un gran impacto en la salud, así como un impacto económico, profundizando nuestra cooperación conjunta.

-Palabras claves: Empresa Mixta, HeberNem, Capacidades de producción, Lukang Heber Biotech Co. Ltd, agrobiotecnología

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-Resumen: The Cuban biotechnology sector has consolidated successful strategic alliances in China for more than 20 years, which have made possible the commercial insertion of innovative biopharmaceutical products with a growing presence in the Chinese market. However, the need for additional funding aiming to expand current development capabilities to earlier stage innovative products and technologies continues to pose a challenge for a more comprehensive integration. In this scenario, the Chinese stock exchange, one of the most important capital markets in the world, presents itself as an attractive financing alternative for bi-national alliances to explore further.
This work reviews the main characteristics of the Chinese stock market as well as its trends in recent years in terms of growth rate, biotech sector performance, major IPOs and future opportunities for Cuban-Chinese entrepreneurships.

-Palabras claves: Cuban Biotechnology, China Stock Exchanges, projects in early stage of development

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-Resumen: La colaboración científica en el CIGB se desarrolla a través de la búsqueda activa de convocatorias internacionales patrocinadas por agencias gubernamentales de cooperación internacional y otros actores multilaterales como la Unión Europea, así como la presentación de proyectos y el seguimiento a la implementación de los mismos. En el proceso de elaboración y presentación de las propuestas participa un equipo multidisciplinario de personas que preparan la documentación necesaria, teniendo en cuenta los requisitos específicos de la convocatoria y la normativa del Ministerio de Comercio Exterior e Inversión Extranjera en su Decreto-Ley No.16/2020 de la Cooperación Internacional.
El CIGB en el año 2023 presentó más de 20 propuestas de proyectos de colaboración internacional a 12 convocatorias internacionales, de las cuales el 50 % fueron aprobadas. Los resultados de las diferentes modalidades de colaboración se han visto reflejados en el acceso a recursos económico-financieros; el intercambio de conocimientos y de experiencias, así como la generación de nuevas propiedades intelectuales. Ha permitido además, el robustecimiento de los expedientes regulatorios (IMPD e IND) -según las ICH- de cada uno de los Proyectos, lo cual ha impactado positivamente en la valorización de los mismos de cara al desarrollo de los negocios del CIGB.

-Palabras claves: colaboración científica, colaboración internacional, negocio.

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: During its more than 35 years of experience on Biotechnology Industry, the Center for Genetic Engineering and Biotechnology has developed its activity under closed cycle process, which implies the commercialization of the products designed and produced in its own facilities. The approaches have covered a wide diapason, with more classic supply and distribution agreements, representation agreements and license agreements, as major contracts type. On the other hand, one of the strengths of this institution has been the development of innovative technologies, protected by intellectual property. One strategy to capitalize such assets and smooth the introduction of the products in foreign markets has been the technology transfer agreements. The present work covers the different types of such agreements and the analysis on how they serve different purposes, and the benefits to both sides in each case. Since several technology transfers have been carried out across the years, this work focuses in those accomplished in Changchun Heber Biological Co., a Joint Venture Company located in China. Different aspects, such as milestones, royalties, and upfront payments, as instruments of the business model, are depicted. In addition, the influence of technology transfer in the fulfillment of regulatory standards, necessary for the success and thrive of the company, are also analyzed.

-Palabras claves: Technology Transfer, Business, Contract, Agreement, Biotechnology

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen:
Introduction: Lung cancer continues to be the leading cause of cancer death worldwide. There are factors that could predict the prognosis of the disease and the response to the treatments. Objective: To evaluate the prognostic factors related to lung cancer and predictors of response to treatment with nimotuzumab. Method: A retrospective, longitudinal, analytical evaluation study was carried out in 498 patients older than 18 years, with a cyto-histological diagnosis of non-small cell lung cancer (NSCLC), in advanced stages, after the first line of oncological therapy, in four clinical trials conducted between 2006-2018.
Patients were classified as Progressors and Non-progressors according to their response to the first line of cancer therapy. Switch maintenance therapy Docetaxel, humanized monoclonal antibody nimotuzumab, and best support therapy were compared. Forest plot and classification tree analyzes were performed; overall survival was determined by Kaplan Meier analysis (significance if p <0.05). Results. The worst prognostic factor after the first line of chemotherapy in advanced tumors was the non-adenocarcinoma histological subtype. Progressive patients benefit from nimotuzumab when ECOG=2, skin color is non-white and the NLR inflammatory index ‹4. For Non-Progressors, the most benefited are those with the worst ECOG. Conclusion: Poor prognostic factors are identified for non-small cell lung cancer and factors that predict greater survival according to the treatments in switch maintenance, with nimotuzumab being the one that provides the greatest benefit, with a 60-month survival rate of more than 14%, more than three times superior to the control and chemotherapy group.

-Palabras claves:
NSCLC, nimotuzumab, prognostic, predictive factor, overall survival.

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Patients with advanced cancer generally have fewer opportunities for treatment. Identifying those subgroups of patients who have managed to survive longer would help understand what factors could be influencing their long survival. International databases provide a large amount of good quality data that can be used for this. This work describes the analysis carried out on lung cancer patients from the international database Surveillance, Epidemiology and End Results (SEER) to determine the existence of subgroups of long-term survivors.
67,980 patients with stage IIIB or IV non-small cell lung cancer at diagnosis were selected from the SEER database. These patients were stratified by sex, age and treatment. Bimodality analyzes were performed and mixture models were fitted to determine the existence of subgroups of long-term survivors in the global data set and within each stratum.
The existence of subpopulations of short- and long- term survivors was confirmed in the global group and within each stratum. In the global group, the subpopulation of short-term survivors, with a median survival of 5.13 months, represents 76% of the total group, while the subpopulation of long-term survivors, with a median survival of 45.6 months, represents 24%. Female patients have a higher median survival than males in the long-term survivor group. As age increases, survival time decreases in the short- and long-term survival subpopulations. Patients who received chemotherapy increased survival time in both subpopulations, maintaining the proportion of long-term survivors.

-Palabras claves: Long-term survivors, Survival, Mixture models, Non-small-cell lung cancer

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Context: Fatty acid translocase CD36 is highly expressed in various tumor types, and its expression is associated with advanced stages, poor prognosis, and reduced survival in several cancers. CD36 promotes tumorigenesis, tumor progression, and metastasis. However, the influence of CD36 expressed in tumor cells on the immune microenvironment remains unknown.
Objectives: To determine the influence of CD36 expression on the tumor immune microenvironment.
Materials and Methods: We transfected B16F10 melanoma cells to obtain a tumor cell line expressing CD36 translocase on the cytoplasmic cell membrane, which was referred to as B16F10CD36. Further, we studied the tumor properties of the obtained cell line both in vitro and in vivo. Finally, we characterized the immunosuppressive properties of CD36 in vivo and extrapolated the results to humans through the analysis of single-cell data from various human tumors.
Main Results: Here, we demonstrate that transfecting B16F10 cells to overexpress CD36 enhances tumor cell proliferation and migration in vitro. In vivo, B16F10 cells expressing CD36 result in higher tumor growth and metastasis rates. Remarkably, we found that in addition to promoting tumor progression, CD36 induces PD-L1 overexpression in melanoma cells. Consequently, B16F0CD36 melanoma cells create an immunosuppressive microenvironment that favors regulatory T cells and exhausted CD8+ T cells.
Conclusions: Our data suggest that CD36 modulates the tumor microenvironment, making it more immunosuppressive. We identify, for the first time, a novel connection between CD36 and PD-L1 during tumor progression. Our results highlight the rationale for a therapeutic strategy combining PD-L1 immune checkpoint therapy with anti-CD36 neutralization.

-Palabras claves: CD36, tumor progression, metastasis, immunosuppression

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: Nuclear factor-kappa B (NF-κB) is a transcription factor that plays a critical role across many cellular processes including embryonic and neuronal development, cell proliferation, apoptosis, immune responses to infection, and inflammation. Dysregulation of NF-κB signaling is associated with inflammatory diseases and certain cancers. Constitutive activation of NF-κB signaling has been found in some types of tumors including breast, colon, prostate, skin and lymphoid, hence therapeutic blockade of NF-κB signaling in cancer cells provides an attractive strategy for the development of anticancer drugs. CIGB-552 is a novel synthetic peptide derived by modification of its primary structure from the antimicrobial peptide LALF32-51 (Limulus sp) which has been shown to be a potential candidate for the anticancer therapy and one of its useful property is the cell-penetrating capacity. CIGB-552 binds and stabilizes COMMD1 protein. The accumulation of COMMD1 promotes the ubiquitination of the RelA subunit of NF-kB and its proteosomal degradation, causing apoptosis of the cancer cells. CIGB-552 modulates the expression of genes related to the cell cycle, apoptosis and oxidative stress among others. CIGB-552 peptide blocks cell proliferation followed by death by apoptosis and causes oxidative damage to lipids and proteins. Preclinical studies conducted with the CIGB-552 demonstrate the antitumor effect of CIGB-552 in animal models of lung and colon cancer; the anti-angiogenic effect; the harmlessness of the treatment by monitoring the body weight of the animals and the accumulation of the peptide in the tumor. These results supported the completion of a Phase I Clinical Study. In the Phase I Clinical Study, the toxicity and pharmacokinetics profile of the CIGB-552 peptide was characterized. The maximum tolerable dose was 4.7 mg. The analysis of the overall response suggests that the CIGB-552 peptide stabilizes the disease. These characteristics make it unique worldwide, constituting the first synthetic peptide aimed at the stabilization of COMMD1 as a regulation route of NF-kB in clinical studies in humans.

-Palabras claves: CIGB-552, COMMD1, NF-kB, antitumoral peptide, cell penetrating peptide

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: The antitumor peptide CIGB-552 has proven to be a highly effective drug in reducing tumors and increasing life expectancy in murine groups undergoing treatment. Its administration is subcutaneous, so when it diffuses through the bloodstream it interacts with plasma proteins. Studies carried out with anticancer drugs showed that they can interact with plasma proteins for their storage, transport and stabilization in the body to their target tissue. To date, the plasma proteins with which CIGB 552 interacts in cancer patients, which could be biomarkers of the disease, have not been described in the literature. For the first time, plasma proteins that interact with the peptide are detected through affinity chromatography with ChemMatrix beads in patients with ovarian cancer. Differences were observed between the protein profile of healthy individuals and cancer patients. Human serum albumin (HSA) was identified by mass spectrometry as an interacting protein with the CIGB-552 peptide.

-Palabras claves: cancer, antitumor peptides, CIGB-552, plasma proteins, affinity chromatography

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-Modalidad: Póster

-Resumen: HER3 es uno de los miembros de la familia de receptores de EGF, cuyo potencial terapéutico fue subestimado durante mucho tiempo debido a su escasa actividad quinasa y su expresión relativamente baja en tumores. Sin embargo, HER3 ha recuperado la atención en años recientes, considerando su sobreexpresión en el contexto de resistencia a terapias dirigidas a EGFR/HER2, y su efecto inhibitorio sobre la inducción de apoptosis. Estas características de HER3 están asociadas con su capacidad única para activar la vía PI3K/Akt, un regulador maestro de la supervivencia de las células tumorales. En este trabajo, presentamos un candidato vacunal basado en HER3 que utiliza el dominio extracelular de este receptor como antígeno y está adyuvada en VSSP/Montanide ISA 51 VG. Se caracterizó la respuesta humoral inducida y su funcionalidad, al evaluar la capacidad de los AcPs generados de promover la degradación de HER3 e inducir citotoxicidad en líneas tumorales HER3+. Se demostró la inducción de marcadores de apoptosis por los AcPs anti-HER3 en células de NSCLC resistentes a erlotinib. Finalmente, se demostró el efecto antitumoral en ratones atímicos portadores de tumores humanos mediante la transferencia pasiva de los AcPs anti-HER3. Estos resultados sugieren la inducción de un antitumoral de los AcPs inducidos por candidatos vacunales basados en HER3 mediante la inducción de muerte celular con características de apoptosis.

-Palabras claves: HER3, vacunas de cáncer, AcP, citotoxicidad, apoptosis

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-Resumen: Background
Lung cancer is a major global public health issue due to its high incidence and mortality. The epidermal growth factor (EGF) and epidermal growth factor receptor (EGFR) system has been linked to the development of this type of tumor. The Center for Molecular Immunology (CIM) developed CIMAvax-EGF, a therapeutic vaccine against EGF. CIMAvax-EGF has high clinical efficacy in advanced non-small cell lung cancer (NSCLC) patients with high serum EGF levels (>870 pg/mL) and squamous cell histology. The EGF+61A>G polymorphism (rs4444903) has been associated with increased serum EGF levels and, subsequently, with increased risk of developing several types of cancer, including lung cancer. The ability of this polymorphism to predict a response to anti-EGFR immunotherapies (Cetuximab) has been described in the literature, particularly linked to an increased proportion of the GG genotype.
Objectives
The purpose of this work was to establish an allele specific polymerase chain reaction (AS-PCR) procedure for easy detection of the EGF+61A>G polymorphism. The aim of this technique was to determine whether the proportion of the GG genotype is increased in long surviving (>24 months) NSCLC patients treated with CIMAvax-EGF compared to NSCLC patients at the time of diagnosis.
Materials and methods
In the implementation of AS-PCR, allele-specific primer sets were designed for each of the EGF+61A>G variants and concordance tests were performed with international reference methods (Sanger sequencing).
The genotypic distribution of the EGF+61A>G polymorphism was studied in 120 healthy subjects, 98 NSCLC patients at diagnosis moment and 54 long-term surviving NSCLC patients treated with CIMAvax-EGF. In the latter two groups, the genotypic distribution was further analyzed by histological variants.
Results
An AS-PCR primer set that shows consistent results with Sanger sequencing in 100% of cases was obtained for EGF+61A>G polymorphism detection. Reproducibility studies confirmed the use of this approach for this polymorphism identification.
In CIMAvax-EGF-treated long-surviving NSCLC patients, EGF+61A>G polymorphism followed an enriched distribution in the GG genotype (1AA:1AG:2GG), different from that presented in healthy subjects and untreated NSCLC patients (1AA:2AG:1GG).
Conclusions
NSCLC patients with the GG genotype could receive a better benefit from treatment with CIMAvax-EGF. Detection of this polymorphism can be accurately performed by AS-PCR, which facilitates its implementation in molecular diagnostics.

-Palabras claves: EGF+61A>G, rs4444903, single nucleotide polymorphism, non-small cell lung cancer, CIMAvax-EGF.

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-Modalidad: Póster

-Resumen: CIGB 552 is a second-generation synthetic peptide under clinical research in cancer patients. Its antineoplastic effect has been demonstrated in vitro in different murine and human tumor cell lines and in vivo in mouse models. As part of the preclinical development, here we investigated both the CIGB-552 dose-repeated toxicity and its pharmacokinetic profile in rats. For dose-repeated toxicity study, three dose levels: 0.35 mg/Kg, 0.7 mg/Kg and 1.4 mg/Kg of CIGB-552 were evaluated by daily Monday to Friday subcutaneous injections during 4 weeks in Sprague Dawley rats. On the other hand, pharmacokinetics in plasma was determined by using an in-house sandwich ELISA. Parameters from the CIGB-552 pharmacokinetic profile were estimated by using the PK Solver software. All the animals in the study completed the dose scheme without significant changes in their weight. Symptoms such as alopecia, anorexia, severe dermatitis or other criteria for euthanasia did not appear during the study. Importantly, data from pathological studies of the main organs did not show any macroscopic alterations. The pharmacokinetic study showed a typical extravascular administration profile with a rapid initial distribution phase. The maximum plasmatic peptide concentration corresponding to 15.3 ng/mL was reached in 15 min. The half-life of peptide in plasma was 1.68 hours, and the mean residence time was 2 hours. Dose-repeated subcutaneous injections of CIGB552 up to 1.4 mg/Kg were well tolerated in rats without signs of toxicity. These data are relevant for future preclinical and clinical research of CIGB-552.

-Palabras claves: CIGB-552; maximum tolerable dose; pharmacokinetics; Sprague Dawley rats, safety

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Context: For long time CIMAvax-EGF has been proven to be a safe and effective therapeutic alternative for the treatment of non-small cell lung cancer. However, for chronic disease or prolonged use it is not appropriate, because its adjuvant accumulates in the muscles at the injection site. Objectives: This research aimed to develop a low-toxicity biocompatible adjuvant that enhances the immune response against EGF. Materials and methods: Hydroxyapatite nanoparticles were obtained by the precipitation method. Its composition, size and shape were verified by FTIR, XRD, TEM and DLS tests. The titers of total IgG antibodies in mice were determined by the ELISA method, as well as their affinity for EGF. Its phosphorylation inhibition capacity was also verified by Western Blot. Main results: It was experimentally demonstrated that the nanoparticles were amorphous hydroxyapatite linked to sodium citrate. The formulations studied generated high antibody titers, with affinity for EGF and the ability to inhibit phosphorylation of the HER1 receptor, without affecting the injection site. Conclusions: The formulations developed through the synthesis of hydroxyapatite nanoparticles could potentially be used for the treatment of cancer and other EGF-dependent diseases in chronic or preventive applications.

-Palabras claves: Cancer, Antibody, Adjuvant, Nanoparticle, Hydroxyapatite

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Introduction. The advent of biopharmaceuticals in modern medicine brought enormous benefits to the treatment of numerous human diseases and improved the well-being of many people worldwide. Among them are IFNs. The short survival of patients with malignant brain tumors is a great challenge now days. HeberFERON is an innovative formulation of IFNs for cancer treatment. Methods. GLIOscreen and Incucyte growth inhibition techniques were used for in vitro anti-proliferative effect of HeberFERON in clones from glioblastomas after surgery. Nude mice model with tumor from U87MG cell line where used to evaluate anti-proliferative properties. Clinical investigations were conducted after approvals of respective ethical committees of participant’s institutions, and patients given their consent to participate. Results. Preclinical studies of HeberFERON formulation, showed an anti-proliferative synergic anti-tumoral effect in GBM cell lines in vitro and in animal models. Tumor suppressor (STAT-1 / STAT-3) function, induction of apoptosis, cell cycle arrest, sensitization to TMZ, inhibition of Hh signaling (PCTH, SMO, Gli1), as well as anti-angiogenesis, were observed in U87MG cell line (GBM origin) in vitro and in vivo models. NK cell activation was also detected. 87 % of clones, established from tissues after surgery from 36 patients with GBM, treated ex-vivo with HeberFERON, showed an inhibition of EGFR mRNA expression; additionally, clones were more sensible to the effect of radiotherapy (40% of clones) or TMZ (60% of clones). The combination of IFNs could benefit the 100% of cases with non-methylated MGMT. Overall, 75% of clones were good responders (high-intermediated inhibition of cell growth) to the anti-proliferative effect of IFNs. Intra-cranial HeberFERON has satisfactory impact in the overall survival of patients with terminal GBM. HeberFERON prolongs the survival (20 months) of patients with recurrent and/or progressive diffuse brain tumor after surgery and RT. A patient after RT (30 sessions, 60 Gray)/TMZ (3 weeks) + surgery + HeberFERON, is alive after two years and 5 months (29 months). Conclusions: HeberFERON after surgery and RT, in the absence of TMZ, extend the survival of patients with malignant brain tumors. The introduction of HeberFERON in the standard of care of patients with GBM, could prolong the survival of patients to more than 30 months

-Palabras claves: Interferon, malignant brain tumor, clinical trial

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: Although traditional microscopic techniques based on histological staining have contributed to the understanding of tumour biology, they provide only static images and thus, limited information regarding this highly dynamic process. Intravital imaging, instead, allows the characterization of the cellular and molecular mechanisms that underlie tumour dissemination, as well as cell-to-cell interactions in animal models in vivo, which are needed to study the dynamic behaviour of metastatic cells. In the last two decades, the application of intravital 2-photon microscopy (2P-IVM), in combination with image-based systems biology, has entailed a key methodology for studying cell interactions in living animals. Moreover, the application of intravital imaging as a method of studying cell dynamics has offered an unprecedented perspective on the complexity of cell behaviour in relation to immune functions. However, this technology can also be applied to study in vivo the biodistribution of new therapies entitle to to target specifically tumor cells. Using 2P-IVM, we have characterized the biodistribution dynamics of the nanosystems engineered to target tumor-invaded lymph nodes, following either subcutaneous (s.c.) or intravenous (i.v.) injection, in mouse implanted with different tumor models. Furthermore, we have investigated the specificity of the newly developed nanosystems, by comparing its accumulation in tumor areas to non-invaded areas of the lymph node, and their capacity to activate the immune system. Finally, we applied microscopic image-based analysis to quantify the differential colocalization of the compounds with blood or lymphatic vessels based on the route of administration

-Palabras claves: In vivo Imaging, Immunotherapy, lymphatic dissemination

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: Introduction: Immune checkpoint inhibitors (ICI) have improved the response and survival rate of many oncological patients. However, immune related adverse effects (irAE) induced by these drugs limit the number of patients who achieve a durable response. Because of the dual role of CD6 in modulating T-cell responses, as well as the overexpression of CD6 ligands on cancer and their association with aggressiveness and metastatic potential in tumors; in this study, we evaluated the effect of the anti-CD6 monoclonal antibody itolizumab on cytotoxic capacity of immune cells of healthy donor against human tumor cell lines. Methods: In the present study, the cytotoxic capacity of itolizumab-treated PBMCs from healthy donors challenge with human tumor cell lines was tested. Tumoral cell line death and PBMC activation were analyzed by flow cytometry, while cytokine production, was assessed in culture supernatant by ELISA. Results: Itolizumab increased the cytotoxic capacity of CD8 and NK T lymphocytes on CD318+ breast, lung, colon and ovarian tumor lines, but not on the line negative for this molecule. This effect of the antibody was associated with the inversion of the NKG2A/NKG2D ratio and the negative modulation of CD5 inhibitory receptor expression in these cell subpopulations, as well as the increase in granzyme B and IFNγ production. Itolizumab also increased the expression of PD1 and CTLA-4 on CD8 T cells challenge with tumor cell lines CD318+, which could counteract irAE associated with prolonged treatment and favor the design of combination therapies with other ICIs. Conclusion: The combined ability of itolizumab to augment the cytotoxic effects of PBMCs and enhance cancer cell killing while maintaining a threshold of inhibition associated with the immunomodulatory properties of CD6 opens a potential approach for cancer immunotherapy that inhibits rather than instigates associated irAEs.

-Palabras claves: itolizumab, immune checkpoint inhibitors, CD6, CD318, cancer

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: Context: In Cuba, lung cancer in 2020 represented the first place in men in incidence and mortality despite the current therapies available. Objective: To evaluate the efficacy and safety of immunotherapies in the treatment of patients with non-small cell lung cancer. Materials and Methods: Three controlled clinical trials were included in CIMAvaxEGF, 3 in Racotumomab and 3 in Nimotuzumab. Forest plot plots and funnel plot plots were used. All analyzes were done with RevMan 5 software, version 5.0. Main results: In the three meta-analyses, a benefit was observed from the combination of immunotherapies with chemotherapy. In general, the addition of immunotherapy to chemotherapy provides better benefit than chemotherapy alone for patients with advanced lung cancer. Conclusions: The immunotherapies CIMAvaxEGF and Nimotuzumab are Registered by our Regulatory Agency CECMED. Both immunotherapies are safe since most of the adverse events reported are mild, not serious and have no causal relationship with the product.

-Palabras claves: lung cancer, CIMAvaxEGF, Racotumomab, Nimotuzumab.

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Context: Prostate cancer (PCa) for men in 2020 worldwide represented the first place in all incidences of neoplasms, with an estimated incidence rate of 30.7 and mortality of 7.7. In Cuba this type of cancer is also in first place with respect to the rest of the types of cancer with an incidence rate of 57.6 and a mortality rate of 24.7. Objectives: To evaluate the efficacy of the immunotherapies CIMAVAX-EGF and Nimotuzumab in the treatment of metastatic and castration-resistant prostate cancer. Materials and Methods: In this study, six clinical trials were evaluated for inclusion in the meta-analysis and only 4 controlled trials were included. Forest plot plots and funnel plot plots were used. All analyses were done with RevMan 5 software, version 5.0. Main results: The meta-analysis of the two trials of Nimotumab+Chemotherapy versus Chemotherapy showed to be in favour of the combination. The meta-analysis of the two trials of CIMAvaxEGF+Chemotherapy versus Chemotherapy showed to be equally in favour of the combination. In general, the addition of immunotherapy to chemotherapy provides better benefit than chemotherapy alone for patients with metastatic and castration-resistant prostate cancer. Conclusions: Both immunotherapies increase the clinical benefit achieved in the median survival of Docetaxel. None of the immunotherapies was added value to the median achieved by Mitoxantrone. Both immunotherapies are safe since most of the adverse events reported are mild, not serious and have no causal relationship with the product.

-Palabras claves: prostate cancer, Nimotuzumab, CIMAvaxEGF, Docetaxel, Mitoxantrone.

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Context: Glioblastoma Multiform (GBM) is the most aggressive brain tumor with a poor survival even using the most recent therapies. The search for new options continues. The combination of Interferon (IFN)alpha and IFNgamma, HeberFERON, have shown antiproliferative response in cell lines in vitro and xenostransplanted models and encouraging results in off-label clinic scenery.
Objectives: To study the growth inhibitory effect of HeberFERON on primary GBM clones and investigate molecular determinants involved in the differentiated response.
Materials and Methods: We studied the growth inhibitory effect of HeberFERON on 34 GBM clones with different molecular profiles, according to TCGA 2010 classification (15 Classical, 4 Mesenchymal, 3 Neural, 4 Proneural and 8 non-classified) by CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega, USA) and live-cell imaging Incucyte system. An Affymetrix Clariom S human HT microarray gene expression experiment (Hamilton Health Sciences Corp. Canada) was performed with samples from the treated and untreated clones. Two-dimensional heatmaps, PCA and Venn diagrams were made. Functional enrichment and Networking analysis were accomplished using Metascape, Toppfun, GeneCodis4 and Bisogenet plugin in Cytoscape framework. Changes in gene expression levels of some biomarkers were studied by qPCR.
Main Results: More than 30% of growth inhibition was obtained in 80% of clones (subdivided into high and intermediate responders, HR&IR) using up to 200 IU/mL of HeberFERON. When studying HR, IR and LR (low response) clones, IFN receptor gene expression for clones classified as non-proneural appears to be a molecular determinant of HeberFERON response and potential prognostic biomarkers. IFN signaling genes, including components of the immune system, are highly enriched in HR&IR clones. HeberFERON induces a balance that favors the expression of STAT1 over STAT3 in clones where STAT1 is expressed. The cell cycle plays an important role in the inhibition of growth by HeberFERON; the expression of FOXM1 and PLK1 genes, with high importance especially in prometaphase in mitosis, showed a decrease in some HR and IR clones. These signaling are not enough to achieve a high antiproliferative response in few clones.
Conclusions: There is a differentiated response to HeberFERON in GBM clones for all four subtypes. IFN signaling pathways are associated with higher antiproliferative responses where basal levels of genes encoding IFN receptors may become prognostic markers for non-proneural clones. Although further testing are needed to define other predictive biomarkers, HeberFERON may be an option as part of a new therapeutic regimen for GBM.

-Palabras claves: glioblastoma, interferon, HeberFERON, biomarkers, growth inhibition

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Nimotuzumab is an anti-EGRr monoclonal antibody that since 2002 obtained its first drug registration in tumors of epithelial origin and to date has approval in the nasopharynx, esophagus, pancreas, high-grade gliomas, lung and more recently in COVID-19. During 2023, new results are presented in China that gave two new therapeutic indications in this country. In head and neck tumors, nimotuzumab in combination with chemoradiotherapy was found to be more effective, significantly prolonging the 3-year overall survival (OS) rate by 11.3% and reducing the risk of death by 25%. mortality by 10.2%, PFS extended to 10.91 months and PFS to 3 years in relation to the group that did not receive the mAb. On the other hand, efficacy in pancreatic adenocarcinoma was evaluated in the phase IIb trial combined with gemcitabine (ClinicalTrials.gov: NCT02395016), showing benefits in patients with locally advanced or metastatic pancreatic disease, with wild-type K-Ras. Eligible patients were randomly assigned to receive nimotuzumab (400 mg once weekly) or placebo followed by gemcitabine (1000 mg/m2 on days 1, 8, and 15, once every 4 weeks). 92 patients and 82 patients with wild-type K-Ras tumors were enrolled. The median OS was 10.9 vs. 8.5 months in the control group, the restricted median survival time (RMST) was 18.05 vs. 11.14 months in the control group, the median PFS was 4.2 vs. 3.6 months and the mean restricted PFS time was 8.08 vs 4.76 months (0.58 [0.38-0.90]; P = 0.036), concluding that nimotuzumab/gencitabine is a treatment of choice in Asian population. Both results, after being evaluated by the CHINA regulatory agency, granted the drug registration in both indications to nimotuzumab in this country.

-Palabras claves: nimotuzumab, pancreatic, head and neck, overall survival, kras

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: Context: The precision medicine has advanced significantly in the last five years. The Pharmacogenomics helps identify interindividual variabilities in drug response (both toxicity and effectiveness). This information will make it possible to individualize therapy with the intent of maximizing effectiveness and minimizing risk.
Objectives. The aims of this work are to present the bases of pharmacogenetic, the state of art and implications and to show the regulatory considerations about this topic, including the Cuban regulation about it.
Material and Methods. It was done a revision in the international literature about the existing regulations, guidance, concept paper, scientific articles and the national regulations related with this topic will be shown.
Main Results. In this section, it will be exposed the main biomarkers approved for drug labelling and the pathologies more investigated for using these biomarkers like cancer. Moreover, it will be shown the importance of the regulation of this topic, taking into account, ethical concern, the validation of biomarkers, and the main elements of Cuban regulation about pharmacogenetics will be exposed.
Conclusion. The hope for the future is that through personalized medicine, doctors and patients will be able to make better-informed choices about treatment. This treatment will avoid the adverse drug reaction to the medication and will improve the diagnosis diseases as well as the prevention and treatment of diseases. The regulation is important in order to avoid discrimination, to make right decision about the rational use of drugs based on population data. There are some challenges in order to implement this novel science.

-Palabras claves: Precision Medicine, regulations, biomarkers

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: Immunotherapy with monoclonal antibodies to checkpoint inhibitors against the PD-1/PD-L1 signaling pathway is a landmark achievement in cancer therapy. Some anti-PD-L1 inhibitors have shown clinical success in a percentage of patients with prolonged survival rates. However, adverse effects accompany these benefits. In this case, strategies with lower toxicity are required. We development of the PKPD-L1Vac vaccine, a new protein vaccine candidate that uses aluminum phosphate as an adjuvant and as an antigen the extracellular domain of human PD-L1 fused to a 47 amino-terminal portion of the LpdA protein from N. meningitides (PKPD-L1). The PKPD-L1 antigen has different physical and biological characteristics than those found in the natural molecule and other PD-L1 vaccine candidates. The chimeric protein has a reduced binding capacity to the PD-1 and CD80 receptors to decrease their pro-tumoral activity. Besides, the distinctive feature of the PKPD-L1 polypeptide to be structurally aggregated could be desirable for its immunogenic properties. PKPD-L1Vac elicited anti-PD-L1- specific IgG antibodies and T lymphocyte-mediated immunity in mice and non-human primates. The vaccine administration demonstrated antitumor activity on CT-26 and B16–F10 primary tumor models in mice. Moreover, the immunization with PKPD-L1Vac increased the tumor-infiltrating lymphocytes and decreased the proportion of CD3+CD8+PD1+high anergic T cells in CT-26 tumor tissues, suggesting that the vaccine may remodel the tumor microenvironment. In summary, the PKPD-L1Vac vaccine exhibits very promising preclinical results and deserves to move forward to a phase I clinical trial.

-Palabras claves: PD-L1, cancer Immunotherapy, PKPD-L1

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: FDA has approved different compounds targeting driver mutations that yield objective clinical response in NSCLC. However, tumors harboring such gene mutations reach 30% of NSCLC patients at the most. The remaining 70% represent an unmet medical need with undefined algorithm of treatment. CK2, a conserved serine/threonine-protein kinase regarded as a kind of non-oncogene addiction, may represent an attractive oncology target in NSCLC. Using a bioinformatics-centered approach, available cancer public databases were firstly interrogated unravelling CK2 overexpression in tumor, metastasis and major components of the tumor microenviroment. Accordingly, essentiality and efficacy analysis indicated that CK2A1 was the most druggable CK2 subunit in vitro. Likewise, hazard ratio analysis indicated unfavorable risk-associated prognosis concerning high CK2 expression in meta-analysis data. Additionally, CK2A1 positively correlated with tumor size and disease stage in a 120-NSCLC patient cohort we investigated at the hospital of the University of South China. To further reinforce the suitability of CK2 as putative oncology target to treat in NSCLC, we performed in vitro and in vivo pharmacological intervention with CIGB-300 which targets both CK2 substrates and the CK2A1. Importantly, this compound inhibited the CK2-mediated phosphorylation cascades involving CDC37/p-CDC37 and RPS6/p-RPS6 in NSCLC lines.CIGB-300 significantly reduced metastasis, angiogenesis and elicited tumor growth delay in adenocarcinoma and squamous carcinoma. Finally, CIGB-300 was safe and well tolerated in Stage-III/IV chemorefractory patients with solid tumors including NSCLC. Altogether, these data point out CK2 as attractive and an actionable molecular target to treat NSCLC. Grant: National key R&D program of China 2021YFE0192100.

-Palabras claves: Protein Kinase CK2, CIGB-300, NSCLC, CK2, Lung Cancer

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-Modalidad: Póster

-Resumen: sdfsdgtyh

-Palabras claves: sd bgt vfr

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-Modalidad:

-Resumen: Cancer treatment with high doses of human recombinant Interleukin 2 (IL-2) has a potent antitumor effect, but limited to a small subset of patients, because of its toxicity and the expansion of regulatory T cells (Tregs). The latter happens because IL-2 has two types of functional receptors (IL-2R): an intermediate-affinity receptor, composed by the subunits β and γ (IL-2Rβγ), expressed in effector cells; and a high-affinity receptor, with the additional α subunit, expressed in Tregs. There are several strategies to overcome this limitation, such as the generation of IL-2 mutated variants (muteins) with changes in the affinity for the subunits of the IL-2R. Disrupting the interaction of IL-2 with the subunit α or increasing the affinity for the subunit β, illustrate two ways to create agonists that modify the balance in favor of effector cells. Despite several examples of each approach have been described, the usefulness of both kinds of muteins for cancer therapy has not been directly compared. The combination of the two classes of mutations in the same molecule could result in further improvement. The current project was aimed at comparing a panel of IL-2 agonists generated in our own laboratory that includes one mutein without interaction with the α chain (no-α), one with increased affinity for the β chain (SB), and one protein that combines both properties (no-α-SB).
We successfully produced the muteins fused to a human Fc fragment using transient transfection of HEK-293T cells. We evaluated the in vitro activity of these molecules using proliferation assays with human and mouse cell lines and lymphocytes. Then we tested the in vivo effect in different tumor models in mice and we studied the composition in the tumor infiltrating lymphocytes (TILs) in some of the models. Our results show a strong stimulation in vitro of cells expressing the IL-2Rβγ, in cells lines and human and mouse CD8 T cells, with those variants with a higher binding to the β chain. Accordingly, we found a strong stimulation of effector cells in vivo at low doses with these two muteins and a potent antitumor effect in all the tumor models that we tested, especially with the no-α-SB mutein. In concordance to this, we found that the effect of the treatment with SB and no-α-SB muteins is supported by a change in the TILs composition in favor of the effector cells. In this work we validate the strategy of increasing the affinity for the γIL-2Rβ like one of the strongest to create anti-tumor drugs based in IL-2 at the same time that we describe two molecules with a great potential for anticancer therapy. We additionally suggest that despite the potency of the stimulation of the effectors cells, it is possible to have subtle differences in the stimulation pattern of lymphocytes induced by the different muteins, theory that is currently being studied at the single-cell level. This could support the usefulness of each mutein in particular therapeutic scenarios.

-Palabras claves: IL-2, agonist, IL-2Rβγ, effector cells, anti-tumor effect

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: Introduction: Cervical cancer is one of the most frequent epithelial tumors, in terms of incidence it is the fourth malignant neoplasm worldwide in the female sex. The high expressions of EGFR present in this neoplasm allow the use of other therapies against this receptor. Method: Explanatory study (Clinical Exploratory Trial) in parallel, randomized, multicenter, prospective and longitudinal groups to demonstrate the feasibility of using biological therapies directed at tumor-associated antigens in patients diagnosed with advanced cervical carcinoma refractory to all prior onco-specific therapies in three treatment groups: CIMAvax EGF® vaccine, nimotuzumab mAb or with the combination of both products Results: 37.7% SV in the LS for the CIMAvax EGF® vaccine, 49.3% for the nimotuzumab mAb and 43.5% for the combination. Overall, 43.9% of the patients were alive 2 years after the start of immunotherapy, which due to their clinical stage at diagnosis had an initial life expectancy of approximately 6 months.

-Palabras claves: advanced cervical cancer, CIMAvax-EGF®, nimotuzumab, survival

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Bispecific T cell recruiting antibodies (Abs-T) are included among the strategies to direct T lymphocytes towards malignant cells, with encouraging clinical results, especially in the treatment of hematological malignancies. At the Center for Molecular Immunology, a human AcBs-T (14F7hT-UCHT1) and its murine surrogate (14F7-2c11) were generated, which recognize NGcGM3, an antigen overexpressed in human tumors and scarcely present in healthy tissues, the first described for this specificity. The present work addresses the obtaining of these AcBs-T of IgG-scFv format, the evaluation of some of their physicochemical attributes and their biological activity in vitro and in vivo. It was verified by SDS-PAGE and SEC-HPLC that the purified AcBs-T maintain a high degree of integrity and purity. Additionally, the generated AcBs-T demonstrated their ability to recognize the ganglioside and the human or mouse CD3 molecule in the context of the plasma membrane, evaluated by flow cytometry. For 14F7hT-UCHT1, its ability to stimulate the production of a panel of human cytokines and to mediate cytotoxicity in NGcGM3 positive cells was demonstrated, specifically and dependent on the amount of antigen expressed on the membrane, in the presence of human PBMCs. The ability of AcB-T to promote the activation and proliferation of human T lymphocytes was also verified, only in the presence of tumor cells. In the case of 14F7hT-2c11, the study of its biological activity in vitro showed its ability to induce the proliferation of mouse T lymphocytes as well as stimulate the production of IFNγ by these cells, using flow cytometry and ELISA, respectively. Furthermore, it was able to mediate cytotoxicity in NGcGM3+ cells in the presence of mouse T lymphocytes and iNKT cells, validating its use to model the antitumor activity of 14F7hT-UCHT1 in immunocompetent mice. The in vivo antitumor effect of 14F7hT-2c11 was demonstrated in a P3X63 (NGcGM3+) therapeutic model, in immunocompetent BALB/c mice. This set of results validates the potential use of the anti-NGcGM3 Ab-T 14F7hT-UCHT1 for cancer therapy.

-Palabras claves: bispecific antibodies, NGcGM3, T cells, immunotherapy, cytotoxicity

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: Overall response rates in advanced NSCLC remains low, particularly for those patients lacking actionable mutations and/or failing immune checkpoint blockage therapy. CK2 is a constitutively active protein kinase promoting/supporting several neoplastic properties. Herein, by using a Cell Penetrating Peptide-based inhibitor coined as CIGB-300, we explore the anti-neoplastic effects caused by interruption of CK2 signaling in lung cancer cells lacking EGFR, ALK and ROS mutations. CIGB-300 penetrated and impaired viability and proliferation of LUAD and LUSC cells in a dose-response manner. Upon internalization, CIGB-300 interacted with CK2 catalytic subunits (ɑ1/ɑ2) and CK2 substrates as well, thus impairing phosphorylation of direct enzyme substrates (CDC37s13, NPM1s125) and downstream signaling proteins (RPS6s325/326). CK2 inhibition induced an early ROS and mitochondrial membrane depolarization, which predates cancer cell death in all cellular models. To further instantiate, the global impact of this peptide in phosphorylation cascades, we conduct a phosphoproteomics experiment in LUSC cell NCI-H226 identifying individual targets and biological processes modulated by CIGB-300. Altogether our in vitro data, corroborates a more complex that formerly anticipated Mechanism of Action, conceptually closer to poly-pharmacology, where simultaneous inhibition of CK2 enzyme and subsets of CK2 substrates have multiple effects on biological pathways or systems, thus exerting anti-neoplastic properties. To enhance the translational power of our research, we conducted experiments in a cell line- and patient-derived xenograft, seeking for efficacy and putative pharmacodynamic biomarkers, both in blood and tumor tissues. In addition, we explore clinical multiomics databases to get insides about CK2 deregulation in lung cancer, and verified such CK2 over-activation in a prospective NSCLC patients study. Finally, in a Phase-I trial study of intravenous CIGB-300 administration in patients with relapsed/refractory solid tumors, an increase above the expected survival time was observed for advanced lung cancer patients. Altogether, our pre-clinical efficacy data, the mechanistic studies and biomarkers thereof, along with the proven safety and tolerability of CIGB-300 in humans, supports the expedite evaluation of this novel anti-CK2 therapeutics on clinical trials for advanced NSCLC with limited therapeutic options.

-Palabras claves: Casein Kinase-2; Target Therapy; Oncology Target; NSCLC; Synthetic Peptide

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-Modalidad:

-Resumen: Context: The anti-CD20 antibody rituximab (RTX) has substantially improved outcomes of patients with B-cell lymphomas, although more efficient therapies are needed for refractory or relapsing lymphomas. An approach to increase the clinical effectiveness of therapy is the use of immunocytokines (ICKs) composed of antibodies and cytokines. In particular, IL-2-based ICKs have shown limited impact in the clinical trials due to the expansion of Tregs. In 2022, it was obtained for the first time, an anti-CD20(hγ1)-IL2no-alpha ICK, based on the fusion of a mutated IL-2 (no-alpha mutein) to an anti-CD20 antibody. This ICK retained the selective immunomodulation of the cytokines and enhanced direct apoptosis, and antibody-dependent cellular cytotoxicity relative to RTX. As consequence, the ICK showed higher antitumor efficacy than the antibody in low doses. Objectives: To evaluate the capacity of recognition of CD20 molecule, NK cell activation, and elimination in vitro of B lymphocytes in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of NHL-B patients. Materials and methods: The evaluation of recognition of CD20 positive cells, NK cell activation in samples from patients with chronic lymphocytic leukemia (CLL), relapsed low-grade NHL-B, and diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL), and elimination of B cell from DLBCL patient and a healthy donor, used as a control, was performed by flow cytometry. IFN-γ secretion in the activation assays was evaluated by ELISA. Main results: The anti-CD20(hγ1)-IL2no-alpha displayed the same recognition profile of CD20-positive peripheral blood cells from B-cell lymphomas patients as RTX. The greatest significant downregulation of the CD16 surface marker expression was observed on NK population of ICK-treated samples. Furthermore, an increased CD107a expression was observed in patients with relapsed low-grade NHL and CLL, while no effect was seen in DLBCL patient cells. Higher levels of in vitro IFN-γ secretion were observed in the presence of anti-CD20(hγ1)-IL2no-alpha compared with RTX and isotype control IC in the samples from low-grade relapsed and CLL patients. Both, anti-CD20(hγ1)-IL2no-alpha and RTX diminished, in vitro, the frequency of B cells (CD19+) from a healthy donor. However, only the anti-CD20(hγ1)-IL2no-alpha significantly reduced the percentage of such immune cell subpopulation from a DLBCL patient. Conclusions: The higher lytic capacity of B cells and NK activation by the IC respect the RTX suggest a potential advantage of this ICK over the RTX, mainly in refractory patients, to be further confirmed in a larger set of samples from NHL patients.

-Palabras claves: Anti-CD20; immunocytokine; IL-2 mutein; immunotherapy; lymphomas

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: El receptor para el factor de crecimiento epidérmico humano HER1 y los receptores relacionados HER2 y HER3 son oncogenes ampliamente caracterizados que regulan atributos o propiedades habilitadoras del fenotipo tumoral. Estos receptores se reconocen como blancos para terapias antitumorales. Sin embargo, el beneficio clínico de las terapias específicas por HER1/HER2 se ve obstaculizado por su toxicidad, unido a la aparición de variantes tumorales resistentes. Esto último se relaciona frecuentemente con la adquisición de mutaciones en HER1. Alternativamente, la regulación positiva de HER2 y HER3 permite una señalización compensatoria en presencia de terapias anti-HER1 y, por tanto, la recaída de los pacientes. Lo anterior sugiere que la inhibición simultánea de HER1, además de HER2 y/o HER3 pudiera evitar o retrasar la aparición de resistencia. En este trabajo proponemos una alternativa terapéutica basada en el reconocimiento de estos receptores HER por anticuerpos policlonales (AcPs) inducidos mediante inmunización con candidatos vacunales específicos. Como prueba de principio, un candidato monovalente específico por HER1 fue inmunogénico (en términos de respuesta de PAbs y CTL) y seguro en modelos preclínicos y en pacientes con carcinoma de próstata. Considerando estos resultados, a continuación, se evaluó el efecto de inhibir simultáneamente varios receptores HER, mediante vacunas multivalentes. Un candidato vacunal bivalente HER1+HER2 generó AcPs capaces de reconocer, inhibir y degradar a ambos receptores diana, al tiempo que indujo efecto antitumoral in vitro e in vivo en líneas tumorales humanas. La inmunización de ratones BALB/c con esta vacuna bivalente alteró, no sólo la progresión de tumores CT26 que expresan a HER1 y HER2, sino también el infiltrado inmune de los tumores tratados. Finalmente, candidatos vacunales multivalentes que incluyeron al HER3 como antígeno adicional indujeron AcPs funcionales con efecto antitumoral en modelos de NSCLC resistentes a terapias anti-HER1/HER2. Nuestros resultados sugieren el potencial de AcPs endógenos anti-receptores HER inducidos por candidatos vacunales específicos para superar algunos mecanismos de resistencia a terapias específicas registradas, y amplían el concepto de efecto antitumoral asociado a la inhibición de receptores HER más allá de un efecto antiproliferativo.

-Palabras claves: receptores HER, vacunas de cáncer, AcPs, efecto antitumoral, apoptosis, microambiente tumoral

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: It has recently been proposed that the polymorphic microbiome may have a protective or deleterious impact on cancer development. Also, it may influence the response to therapies. Consequently, there is growing interest in identifying microorganisms related to one effect or the other. However, given the complexity of the host-microbiome relationship, we hypothesize that certain microorganisms may play a dual role. This condition could change the perception of therapeutic interventions in patients with this disease. Therefore, in this work a non-systematic review was carried out of publications that appear in Web of Science, Scopus and Pubmed, related to the agonist and antagonist mechanisms of the genus Enterococcus in the development of cancer. To detect structural similarities, a BLAST analysis was performed using 82 human growth factors from the UniProt, setting the genus Enterococcus and an amino acid sequence identity greater than or equal to 50%.
We found that Enterococcus faecium is a commensal species of the gastrointestinal tract that secretes the peptidoglycan hydrolase SagA; which generates mucopeptides with the ability to bind to the NOD2 receptor, an interaction related to the T cell response. Additionally, this species can release IMP into the medium. This metabolite is catabolized, by extracellular phosphatases of the intestinal epithelium, to inosine that contributes to Th1 differentiation. Contrary to these effects, we found that E. faecium is an O2- producer. This phenotype may be related to the development of colorectal cancer, driven by genomic instability. Besides, as a member of the Enterococcus genus, this species has the ability to form biofilms, where they can interact with a community of microorganisms, capable of secreting factors such as: Colibactin and Clostridial C3 toxins, related to tumor initiation, promotion and progression. Finally, an association between butyrate production and the species analyzed was described. Butyrate has a complex physiological effect. Depending on the context, it can inhibit cell proliferation or stimulate the senescent phenotype, associated with cancer. Interestingly, we found that this species presents the proteins P54 and the Putative signal peptide peptidase SppA, which share sequence similarity with VEGF B (52.9%) and human IL-7 (70%) respectively. Although it is known that similarity does not imply mimicry, we consider that this finding can be subjected to experimental verification.
According to these, Enterococcus faecium may play a dual role in cancer development. This quality must be taken into account in the design of new therapeutic strategies and imposes a warning on current ones based on its use as a probiotic.

-Palabras claves: Butyrate, Cancer, Dual Role, “Enterococcus faecium”, SagA

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-Modalidad: Póster

-Resumen: La COVID-19, causada por el virus SARSCoV-2, fue declarada emergencia internacional por la OMS el 30 de enero del 2020. Contar con vacunas constituyó un eslabón fundamental para combatir la pandemia y controlarla. Los aspectos preclínicos, constituyen una exigencia, siendo requisitos para la aprobación y uso de un producto medicinal. Se incluyó la realización de un programa completo de estudios toxicológicos: a dosis única, dosis repetida en especie roedora, y no roedora. Además, ensayos del efecto sobre la reproducción y desarrollo prenatal, correlacionando con las edades fértiles, embarazadas y fetos, completándose con un estudio en animales juveniles para incorporar su administración en edades pediátricas, desde la categoría de neonatos. La vacuna Abdala, demostró ser segura, en hasta el doble de la dosis terapéutica en PNH, especie más cercana al hombre filogenéticamente, y en ratas Sprague-Dawley hasta 30 y 111 µg/kg, correspondientes al 42 y 155 veces superior a la dosis terapéutica, sin elementos de toxicidad. Tampoco mostró toxicidad en ratas Sprague-Dawley adultas preñadas, en el desarrollo embrionario y fetal de la descendencia, ni sobre las funciones reproductivas, corroborando la ausencia de signos de toxicidad sobre la supervivencia, el crecimiento postnatal y el desarrollo físico y neurofuncional en la descendencia y hasta el final de la lactancia, de ahí que los diseños sostuvieron las propuestas clínicas y avalaron su uso generalizado. Los resultados aportados, propiciaron diseños creativos y suficientes, con la realización de un programa completo que permitió el AUE de Abdala, producto con capacidad para combatir la Covid y demostró ser seguro y capaz de levantar y mantener los niveles de anticuerpos con independencia del estrato poblacional. Así mismo, el programa preclínico en su conjunto marcó un antes y un después en la previsión de un diseño y la realización de estudios en condiciones de pandemia

-Palabras claves: Vacuna, estudios de seguridad no clínico, Abdala, SARS-CoV-2

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-Resumen: La pandemia COVID-19 causada por el coronavirus SARS-CoV-2 causó más de 6 millones de fallecidos a nivel mundial. Entre las alternativas exploradas, paralelas al desarrollo de vacunas específicas, se evaluaron varias vacunas contra enfermedades infecciosas, con propiedades inmunopotenciadoras demostradas que generaran en efecto de estimulación y posterior “re-programación” del sistema inmune innato. Este efecto conocido como inmunidad entrenada ha sido explorado principalmente en vacunas como BCG, pero no en vacunas basadas en vesículas de membrana externa como VA-MENGOC-BC®. Este trabajo se propuso como objetivo la determinación de marcadores de activación y producción de citoquinas pro-inflamatorias en monocitos CD14+ de sujetos vacunados con VA-MENGOC-BC®. 15 sujetos de diferentes grupos etarios fueron vacunados con una dosis única de la vacuna antimeningocócica VA-MENGOC-BC®. Siete días post vacunación se extrajeron células mononucleares de sangre periférica y determinaron marcadores de activación CD80 y CD209, así como la frecuencia de células CD14+ secretoras de IL-6 y TNF-α mediante citometría de flujo multiparamétrica. Como resultado se observó que tras la vacunación las células CD14mid/lowCD11c+ incrementan la secreción de IL-6 y TNF-α. Por otro lado se observó un aumento significativo de la expresión de marcadores de maduración en las células CD14highCD11c+, pero La frecuencia de monocitos (CD14highCD11c+) y células dendríticas (CD11c+CD14mid/low) en sangre periférica no varía de manera significativa con la vacunación. En conclusión, la vacunación con VA-MENGOC-BC® tiene un efecto inmunopotenciador sobre poblaciones de células CD14+.

-Palabras claves: inmunopotenciación, inmunidad entrenada, vacunas, COVID-19

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-Resumen: The Dengue virus complex (DENV), formed by four serotypes, constitutes the most important arbovirus affecting humans. The structural domain III of their envelope protein (DIII) elicits strongly neutralizing serotype-specific antibodies. Contrasting results have been obtained regarding their role in the serum neutralizing activity of infected patients. We used a DENV immune serum from a secondary infection to examine the impact of characterizing the anti-DIII antibody response after affinity purification with recombinant DIII proteins to eliminate potential interferences from the interactions with human plasma proteins and other anti-DENV antibodies. Total anti-DENV IgG repertoire and anti-DIIIE antibodies were compared in functionality. In early convalescence, reactivity of anti-DIII antibodies is serotype specific and exhibits the strongest reactivity with infecting serotypes. Purification of anti-DIII antibodies emphasizes the reactivity profile as compared to total IgG fraction and serum. Serotype-specificity of the virus neutralization activity correlated with the apparent kD of the binding to recombinant DIIIs.

-Palabras claves: domain III, dengue, envelope protein, antibodies

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-Resumen: Contexto: La aparición de nuevas variantes del SARS-CoV-2 supone una amenaza para los progresos realizados en la contención del COVID-19. La vacuna Abdala se basa en una proteína RBD recombinante (cepa Wuhan-Hu-1) expresada en levadura y adyuvada en hidróxido de aluminio. Su eficacia contra la COVID-19 sintomática fue del 92,28%. Sin embargo, se informó de que la variante BA.1 era menos susceptible a los anticuerpos de neutralización inducidos por la vacunación.
Objetivos: El objetivo fue comparar la respuesta inmunitaria provocada por la rRBD_Wuhan (IFA vacuna Abdala) con una formulación similar que utilizaba rRBD de la variante BA.1 (rRBD_BA.1), una mezcla de ambas rRBD y un régimen de inducción y refuerzo.
Materiales y métodos: Ratones Balb/c fueron inmunizados en los días 0, 7, 21, 77 con: 1. Placebo, 2. RBD_Wuhan, (3 inyecciones)/RBD_BA.1 (1 inyección), 3. RBD_Wuhan+RBD_BA.1 (mezcla), 4. RBD_Wuhan (Abdala) y 5. RBD_BA.1. Los grupos 2, 4 y 5 fueron inoculados con 30 μg de proteína por ratón, mientras que el grupo 3 recibió 15 μg de cada proteína. Los días 19, 33, 41, 61, 75, 91 y 109 se sangraron los ratones para detectar anticuerpos IgG RBD-específicos. La proliferación de células CD3+ CD4+ RBD-específicas se evaluó mediante tinción con CFSE y citometría de flujo. Además, realizamos un ensayo de microneutralización con aislamientos de SARS-CoV-2 D614G y BA.1 tras la tercera y cuarta dosis. Los inmunógenos se prepararon con la misma composición y procedimiento que la vacuna Abdala.
Principales resultados: Se estudió la cinética de la respuesta de anticuerpos. A partir de los resultados, se comprobó que las tres inoculaciones con RBD_Wuhan (grupos 2 y 4) provocaron anticuerpos IgG cross-reactivos RBD_BA.1-específicos, aunque a un nivel inferior al del grupo inoculado con RBD_Wuhan+RBD_BA.1 (grupo 3). Todos los grupos se comportaron de la misma manera con respecto a los anticuerpos IgG RBD_Wuhan-específicos. Sin embargo, después de la 4ª inyección, los animales inmunizados con RBD_Wuhan desarrollaron un menor nivel de anticuerpos IgG RBD_BA.1-específicos que el resto de grupos (Grupos 2, 3 y 5). También hubo una menor producción de anticuerpos IgG RBD_Wuhan-específicos en este grupo en comparación con RBD_Wuhan/RBD_BA.1 (grupo 2) y RBD_Wuhan+RBD_BA.1 (grupo 3), pero un nivel similar al de RBD_BA.1 (grupo 5). En cuanto a la neutralización, los sueros de todos los grupos mostraron un aumento de los títulos de neutralización frente a las cepas D614G y BA.1 entre la 3ª y la 4ª dosis, con la excepción del grupo 5 (RBD_BA.1), que mostró una escasa actividad de neutralización cruzada frente a la cepa D614G. En particular, los ratones inmunizados con RBD_Wuhan (grupo 4) desarrollaron altos títulos de neutralización cruzada frente al aislamiento BA.1. Por último, a los 32 días de la última dosis detectamos niveles importantes de proliferación de células CD3+ CD4+ RBD_Wuhan y RBD_BA.1-específicas en todos los grupos excepto en RBD_Wuhan+RBD_BA.1 (grupo 3).
Conclusiones: Nuestros hallazgos proporcionan información valiosa sobre la posible causa de la eficacia de la vacuna Abdala en el control del COVID-19 causado por la variante BA.1. También sugiere que la vacunación con Abdala podría inducir protección frente a múltiples variantes omicrón.

-Palabras claves: vacunas COVID-19, SARS-CoV-2; ratones Balb/c; variante BA.1; anticuerpos neutralizantes

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-Resumen: Context: Acute kidney injury (AKI) is a syndrome characterized by a rapid decline in kidney function, with a prevalence of up to 60% in critically ill patients. It causes 50% of deaths in intensive care units. There is no FDA-approved therapeutic. Objective: Obtaining and biochemical, histological, and molecular characterization of an animal model of AKI that allows exploring the possible benefit of different anti-inflammatory drugs such as CIGB-814 in the repair of AKI, as well as in reducing renal fibrosis, thus preventing the transition towards chronic kidney damage. Methods: We inoculate two groups of C57BL6 mice ip in with a single dose of 0.3M NaHCO3 or folic acid 250 mg/Kg weight dissolved in 0.3M NaHCO3. We sacrificed six animals from each group on days 3, 7, and 28. To determine urea and serum creatinine we used blood samples. We used samples of kidney tissue for histological and differential gene transcription studies. We calculate the kidney weight index in both groups. To compare biochemical and histological variables, we used the student's T-test. We evaluate the transcription levels of several genes related to inflammation processes, kidney damage, and fibrosis by qPCR. Results: We observed a significant increase in the renal weight and creatinine index on the third day after the administration of the acid folic compared to the control group, as well as a significant increase in urea levels on days seven and 28 after administration. A significant decrease in renal weight index was observed 28 days after induction of renal damage. At the histological level, we observed a loss of the brush border and dilation of the renal tubules, changes that indicate kidney damage. In addition, we appreciated a loss of nuclei of the cells of the renal tubules on days three and seven after the administration of the nephrotoxic agent. The qPCR detected an increase in the transcription of biomarkers of kidney damage, as well as genes for pro-inflammatory cytosines and chymosins at days 3 and 7. An increase in fibrosis-related genes was observed 28 days after damage induction. Conclusions: Renal function tests (creatinine and urea) indicated renal failure in the AKI model on days 3, 7, and 28. Histology and qPCR demonstrated that the model presented damage to the renal tubules on days 3 and 7. The qPCR at the acute phase of the model revealed the existence of an inflammatory process. Additionally, the increase of fibrosis-related genes observed on day 28 could show a transition to chronic damage. The model is optimal to evaluate the therapeutic effect of CIGB-814 in the AKI repair, and in reduction of renal fibrosis, avoiding the transition to chronic kidney damage.

-Palabras claves: animal model, acute kidney injury, qPCR

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-Resumen: Introducción: Soberana-02 es una vacuna conjugada eficaz contra el COVID-19 basada en la conjugación química del Receptor Binding Domain (RBD) del virus SARS-CoV-2 y el preparado de toxoide tetánico inactivado.
Materiales y métodos: Esta vacuna conjugada se digirió junto con LEP y tripsina usando el protocolo de digestión MED-FASP. La mitad de la mezcla de péptidos se analizó directamente mediante LC-MS/MS y la otra mitad se purificó mediante cromatografía de afinidad Ni-NTA antes del análisis LC-MS/MS, y el eluato resultante se enriqueció en péptidos de tipo 2 que contenían el extremo C-terminal. El péptido entrecruzado del RBD (538CNVF541-HHHHHH) con varios residuos internos de lisina en péptidos trípticos derivados principalmente de la neurotoxina de C. tetanis.
Resultados: El RBD del SARS-CoV-2, así como 385 proteínas del toxoide tetánico, se identificaron coincidentemente con un FDR ≥ 1 % mediante tres softwares diferentes (MASCOT, Peaks y Maxquant). La mayoría de los residuos de lisina en la preparación de toxoide tetánico se encontraron libres, pero también formilados, modificados como un derivado de metilol, metilados y formando una base de Schiff. Varios aminoácidos se entrecruzaron mediante puentes de metileno intermoleculares o intramoleculares en los péptidos de tipo 2 o enlazados en bucle, respectivamente. Por el contrario, los aminoácidos de la RBD se encontraron sin modificar, lo que confirma que estas modificaciones se introdujeron durante el proceso de desintoxicación con formaldehído.
Conclusiones: Entre las proteínas derivadas de C. tetanis, la neurotoxina inactivada fue la proteína más abundante representando el 30-60 % del total de proteínas según los resultados proporcionados por los métodos de estimación de abundancia de proteínas 3-top, TPA e iBAQ. Se verificó el 99 % de la secuencia del toxoide tetánico, lo que sugiere que los epítopos T que contienen lisina, si se vieron afectados, tuvieron lugar solo parcialmente durante el proceso de inactivación y conjugación. Se asignaron quince sitios de conjugación entre la neurotoxina y el RBD recombinante del SARS-CoV-2 según los espectros de MS/MS.

-Palabras claves: Palabras Claves: Vacuna Conjugada; RBD; Toxoide Tetánico; COVID-19; Péptido Entrecruzado.

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-Resumen: A recombinant receptor binding domain (RBD) of SARS-CoV2 spike protein in a dimeric form is the antigen in the Soberana 01 and Plus vaccines. This construct contains two polypeptides with the sequence 319-541 of the spike, bridged by an intermolecular disulfide bond between cysteines 538. In the fermentation process only a fraction of the RBD naturally dimerize, since thiol-containing metabolites caps the unpaired cysteine. The aim of this work is to establish a chemical procedure for converting the monomeric RBD into its dimeric form as an additional source of vaccine antigen. For this, the capping of cysteine 538 in the monomer was selectively removed by reduction with TCEP and washed out. Then dimerization was studied with or without oxidants. Dimers were purified by SEC and the selected one was further characterized in order to assure comparability with the productive RBD dimer. SEC-HPLC and SDS-PAGE allowed verifying an increase in dimer proportion up to 50-60 % without any supplementary reagent. Variation in concentration and temperature did not affect results. Addition of oxidants (ie. DSMO and dehydroascorbate) does not improve yield, except for Cu2+ which offers an additional 10%. Conversely, only batches obtained without oxidant did conserve full antigenicity as ACE2 recognition. Characterization by SEC-HPLC, SDS-PAGE, MS, DLS, CD and dot-blot showed similar results respect to naturally occurring dimer. In summary, it is possible to chemically obtain RBD dimer starting in its monomeric form, preserving the natural antigen characteristics.

-Palabras claves: Dimerization,Monomer,Oxidants

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-Resumen: Contexto: En el desarrollo de varias enfermedades autoinmunes e infecciosas se produce un fenómeno de hiperinflamación que puede llevar a los pacientes a la incapacitación parcial e incluso a la muerte. En este sentido, el CIGB desarrolló el Jusvinza, un péptido inmunoregulador derivado de la proteína de estrés celular HSP60, a la cual se adjudica un papel en la regulación de la respuesta inmunitaria, con beneficios demostrados en el tratamiento de la Artritis Reumatoide y la COVID-19.
Objetivos: Demostrar la Seguridad del Jusvinza a nivel No Clínico.
Materiales y Métodos: El programa No Clínico del Jusvinza, aún en desarrollo, diseñado según las Guías ICH y realizado bajo el cumplimiento de las Buenas Prácticas de Laboratorio, implicó la realización de estudios toxicológicos de Toxicidad a Dosis Única en ratas, Toxicidad a Dosis Repetidas en ratas, perros y Primates No Humanos, Genotoxicidad, Toxicidad de la Reproducción, Toxicidad en Animales Juveniles y Tolerancia Local.
Resultados: En los estudios mencionados se demostró la ausencia de muertes y alteraciones clínicas y fisiológicas vinculadas a la acción del Jusvinza,
Conclusiones: Hasta el momento puede afirmarse que Jusvinza es un producto seguro y apto para continuar su desarrollo No Clínico y Clínico.

-Palabras claves: Jusvinza, Toxicidad, Artritis Reumatoide, Seguridad

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-Resumen: Introducción: Los laboratorios de ensayos clínicos se exponen a una gran variedad de riesgos biológicos que podrían generar un desastre sanitario si no se aplican medidas de bioseguridad y bioprotección, para evitarlos o mitigarlos. El Centro de Investigaciones Científica de la Defensa Civil tiene dentro de sus instalaciones un Laboratorio de Nivel de Seguridad Biológica 3 y entre sus misión es participa de conjunto con otras instituciones en la vigilancia y el monitoreo permanente de la aparición de enfermedades que puedan ocasionar graves epidemias de origen natural o introducida. Se evaluó el desempeño del sistema de gestión del riesgo biológico que permite que la organización identifique, evalué y controle los riesgos inherentes a sus actividades. El objetivo del presente trabajo fue presentar los resultados del desempeño de este sistema. Materiales y métodos: Se aplicó como herramienta la lista de chequeo que permitió evaluar cada requisito del sistema de gestión, la revisión por la dirección del sistema, las auditorías internas, la revisión de la documentación, entre otros. Resultados: El sistema de gestión del riesgo biológico se clasificó como satisfactorio (95 %) en lo que jugó un rol importante la capacitación continua del personal, la existencia del Comité de gestión del riesgo biológico, el seguimiento a las no conformidades derivadas de las auditorías, la aplicación de medidas correctivas eficaces, el establecimiento de una documentación sólida, el seguimiento de todos los incidentes y accidentes de trabajo, la estricta vigilancia médica, el manejo adecuado de los desechos, los análisis de riesgo para cada proceso y la identificación de oportunidades de mejora. Conclusiones: Los resultados evidenciaron un adecuado desempeño del sistema que garantizó la seguridad del personal expuesto al riesgo biológico, la comunidad y el medio ambiente.

-Palabras claves: riesgo biológico, bioseguridad, bioprotección, laboratorio de contención, sistema de gestión del riesgo biológico

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-Resumen: Avidity is defined as the binding strength between bivalent and multivalent interactions of antigen with antibody. Vaccination causes an increase in antibody avidity, suggesting possible antibody maturation after vaccination. A strong positive correlation has been demonstrated between IgG titers and avidity and of these variables with viral neutralization titers by vaccination. The aim of our work was to develop and validate an avidity test. This test allowed evaluating samples from individuals vaccinated with Abdala and the nasal vaccine candidate Mambisa. A modified ELISA-type assay was employed, where the plates were coated with the RBD protein obtained in Pichia pastoris from the D614G (wt) or OMICRON (BA.5) variants. To analyze the avidity of the antibodies in the vaccinated, the elution-based methodology was used, which consisted of adding potassium thiocyanate (KSCN) as a chaotropic agent, after the formation of the antigen-antibody complex. The developed test showed 100% sensitivity, 94% specificity and accuracy of 97.3%. The samples of convalescents who received a booster dose with the Abdala or Mambisa vaccines showed high avidity indexes against both variants. Avidity indexes obtained had a strong correlation with the IgG titers and the neutralization titers.

-Palabras claves: COVID-19, AVIDITY, ABDALA, MAMBISA, VACCINE

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-Resumen: Dengue is an emerging disease caused by any of the four serotypes of the virus of the same name (DENV1-4), with an increasing incidence of more than 30 times in recent decades. The infection can cause severe clinical symptoms such as hemorrhages and hypovolemia, potentially fatal. A secondary heterologous infection increases by an order of magnitude the probability that the infected person will develop the most severe forms of the disease, where cross-reactive non-neutralizing antibodies (Abs) promote the infection by Antibody Dependent Enhancement (ADE). DENV is an enveloped. The envelope (E) protein covers most of the surface of the virus particle and is the target of the vast majority of the humoral response generated during the infection. The envelope protein is folded in three structural domains: domain I, domain II and domain III (DIII), of which the DIII mediates pivotal interactions with cell surface receptors and soluble plasma factors modulating the course of the infection. The DIII is also the target of potently neutralizing Abs which is why recombinant preparations of this domain has been evaluated as subunit vaccines to control dengue virus infection. Yet, the structural determinants in the recognition of the protective response generated against the DIII are not completely understood. Here, we generated an anti-DIII1 response in goat using a recombinant DIII serotype 1 protein (DIIIE1) as immunogen. The anti-DIIIE1 Abs purified by affinity chromatography were used to characterize the IgG response in the recognition of recombinant DIII of the four viral serotypes. Also, the neutralization capacity against the DENV1-4 was determined. The dominant epitopes in the response against the recombinant protein were identified using a library of 70 alanine mutants of DIIIE1 amino acid residues. IgG was found centered in the AB-loop, a highly conserved and unexposed site in the virus particle. We compared anti-DIIIE1 response with human anti-DIII Abs reactivity generated by natural primary and secondary natural infections. This work contributes to the understanding of the humoral response against recombinant DIII proteins for the development of DIIIE-based vaccines.

-Palabras claves: Dengue virus, domain III, IgG response

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-Resumen: El mono verde caribeño (Chlorocebus aethiops sabaeus) ha demostrado ser una especie de gran utilidad para la evaluación de seguridad y eficacia de fármacos y vacunas para uso en humanos. El desarrollo de una vacuna para la prevención del dengue ha sido obstaculizado debido a la falta de un modelo animal confiable. Los ensayos de vacunas incluyen evaluación de seguridad, inducción de viremia, antigenemia, inmunogenicidad y eficacia. El objetivo del presente trabajo es brindar información sobre la utilidad y ventajas de mono verde caribeño para los ensayos no clínicos de candidatos vacunales contra el dengue. Se realiazó una revisión bibliográfica de las bases de datos Scielo, PubMed y Google Académico. Se consultaron un total de 34 referencias bibliográficas. Este biomodelo comparte más del 90 por ciento del ADN humano y gracias a su biología es muy útil en varios campos de investigación como la toxicología, la farmacología y la inmunología; siendo el primate más citado tras el macaco Rhesus, y una de las especies ya estanendarizada y caracterizada. Por su homología genética con el ser humano el uso de este primate en las investigaciones biomédicas permite la obtención de grandes avances en la biomedicina. En el caso específico del dengue, esta especie constituye un biomodelo experimental relevante, pues reproduce períodos de viremia, variaciones en parámetros hemoquímicos y respuestas de anticuerpos, muy similares a los que ocurren en humanos. Los macacos Rhesus y macacos Cynomolgus son las especies que más comúnmente se han utilizado en las investigaciones biomédicas. Sin embargo, la reducción drástica de sus poblaciones propicia que se valore el uso de otras especies alternativas. En este sentido, una de las más promisorias y de mayor perspectivas es el mono verde. Entre las ventajas de su utilización están sus bajos costos de mantenimiento y su mayor disponibilidad. Además, el hecho de no transmitir el virus del herpes tipo B, así como la abundancia del mismo en toda la zona del caribe, hacen que el mono verde constituya una especie alternativa y promisoria para la obtención de una vacuna segura y eficaz contra el dengue.

-Palabras claves: mono verde caribeño (Chlorocebus aethiops sabaeus), biomodelo relevante, seguridad, eficacia, candidatos vacunales, dengue.

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-Resumen: Los ensayos no clínicos in vivo de toxicología regulatoria de vacunas han sido obligatorios desde la última década del siglo XX. El impacto reciente de COVID-19 subraya la necesidad de mejorar los diseños experimentales para mejorar el valor predictivo de los ensayos clínicos. La investigación biomédica, junto con la evolución de las perspectivas sobre el bienestar animal, destaca la importancia de seleccionar modelos animales apropiados. En este contexto, los primates no humanos, en particular el mono verde del Caribe, han sido reevaluados como biomodelos relevantes para las pruebas de productos. En los últimos cuatro años, la aplicación de metodologías, técnicas y procedimientos novedosos y refinados ha ganado importancia. Nuestro objetivo era implementar estos enfoques en el entorno experimental. Instalaciones: mantenimiento, modificación y adecuación del sistema de alojamiento, comederos, bebederos, iluminación y climatización; enriquecimiento ambiental/alimentario: readecuación del entorno, establecimiento de piscinas para baño/aseo, suministro de frutas y forraje; selección de: sexos, estratos etarios, sistema de identificación, sujeción/manipulación, método de medición de signos clínicos vitales, exámenes diagnósticos complementarios, sitio de administración, muestreos y análisis correspondientes, y análisis de parámetros fisiológicos. Todo esto permitió: la obtención de datos novedosos y otros que ya no se obtenían, mayor fiabilidad y menor variabilidad de los datos, caracterización del modelo en nuestras condiciones e implementación/actualización/establecimiento de POT más complacientes y seguros, cumpliendo con el bienestar animal y adecuado punto final; permitiendo en definitiva que los productos estudiados sean presentados para su registro.

-Palabras claves: mono verde caribeño, PNH, animales de laboratorio, modelo animal, toxicología no clínica in vivo

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-Resumen: Contexto: La infección por el VIH aun es un problema de salud a nivel mundial debido a la propagación continua de la enfermedad. Su diagnóstico serológico ha evolucionado al empleo de ensayos cada vez más sensibles y con buen desempeño, lo que ha logrado reducir en una semana el período de ventana de la infección. Para el desarrollo de ensayos con estas características es fundamental contar con moléculas que posean una elevada antigenicidad que garanticen este objetivo. Objetivos: Evaluar dos péptidos sintéticos correspondientes a una región de la proteína de transmembrana gp41 del VIH-1 y otro a la proteína gp36 del VIH-2 para el desarrollo de un ensayo UltramicroELISA de última generación. Materiales y métodos: Se diseñó un ensayo inmunoenzimático tipo sándwich de doble antígeno y se determinaron las condiciones óptimas de funcionamiento de los péptidos sintéticos en el recubrimiento de la fase sólida del ensayo y de sus pares biotinilados como conjugado. También se evaluó la antigenicidad y especificidad de estos péptidos con diferentes paneles de muestras positivas y negativas. Resultados: Los péptidos sintéticos presentaron excelentes propiedades antigénicas (reactividad superior al 96 %) y una especificidad mayor del 98 %. Conclusiones: Estos resultados sugieren que estos péptidos sintéticos pueden ser utilizados como reactivos biológicos para el diagnóstico del VIH.

-Palabras claves: Antígeno, péptido, VIH, diagnóstico, UltramicroELISA

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-Resumen: La demanda creciente de medios de transporte de muestras clínicas para el diagnóstico molecular de la COVID-19, condujo a la necesidad de desarrollar medios de transporte para el diagnóstico del SARS-CoV-2; por lo que el Centro Nacional de Biopreparados (BIOCEN), desarrolló una gama de medios de transporte de muestras.La introducción de estos medios de transporte en el diagnóstico molecular debe demostrar su capacidad de mantener estable y bajo diferentes condiciones de almacenamiento la integridad de los antígenos virales y los ácidos nucleicos, objetivo de este trabajo. Los medios de transporte de muestras: Medio de Transporte Viral (BTV); Medio de Transporte Esencial (BTE); Medio de Transporte Universal (BTU) y Medio de Transporte Viral Inactivado (TAN) (BioCen) se retaron con diferentes dosis infecciosas del virus y se incubaron por un intervalo de 7 días a 4 °C y temperatura ambiente; el medio TAN se almacenó solo a temperatura ambiente. La estabilidad del SARS-CoV-2 en los medios de transporte de muestras de BioCen, se evaluó mediante la detección del material genético. Los medios BTV, BTE y BTU almacenados a 4°C, permiten preservar el material genético del SARS CoV-2 durante el periodo evaluado, pero su capacidad de conservación del mismo se ve afectada cuando se almacenaron a temperatura ambiente. El Medio de Transporte Viral Inactivado (TAN) almacenado a temperatura ambientefue capaz de inactivar el virus SARS-CoV-2 y mantener estable el material genético hasta siete días. Los medios de transporte desarrollados por el BIOCEN permiten la conservación del material genético del SARS-CoV-2. Estos resultados sustentaron el Autorizo de Comercialización de los Diagnosticadores por el Centro Estatal para el Control de los Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (CECMED) y su introducción durante la pandemia en la red de diagnóstico molecular del SARS-CoV-2 en el país

-Palabras claves: SARS-CoV-2, medios de transporte de muestras clínicas, almacenamiento, conservación material genético, inactivación

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-Resumen: Introducción: La demanda creciente de medios de transporte de muestras clínicas para el diagnóstico molecular de la COVID-19, condujo a la necesidad de desarrollar medios de transporte para el diagnóstico del SARS-CoV-2; por lo que el Centro Nacional de Biopreparados (BIOCEN), desarrolló una gama de medios de transporte de muestras. La introducción de estos medios de transporte en el diagnóstico molecular debe demostrar su capacidad de mantener estable y bajo diferentes condiciones de almacenamiento la integridad de los antígenos virales y los ácidos nucleicos, Objetivo de este trabajo. Materiales y métodos: Los medios de transporte de muestras: Medio de Transporte Viral (BTV); Medio de Transporte Esencial (BTE); Medio de Transporte Universal (BTU) y Medio de Transporte Viral Inactivado (TAN) (BioCen) se retaron con diferentes dosis infecciosas del virus y se incubaron por un intervalo de 7 días a 4 °C y temperatura ambiente; el medio TAN se almacenó solo a temperatura ambiente. La estabilidad del SARS-CoV-2 en los medios de transporte de muestras de BioCen, se evaluó mediante la detección del material genético. Resultados: Los medios BTV, BTE y BTU almacenados a 4°C, permiten preservar el material genético del SARS CoV-2 durante el periodo evaluado, pero su capacidad de conservación del mismo se ve afectada cuando se almacenaron a temperatura ambiente. El Medio de Transporte Viral Inactivado (TAN) almacenado a temperatura ambiente fue capaz de inactivar el virus SARS-CoV-2 y mantener estable el material genético hasta siete días..Conclusiones: Los medios de transporte desarrollados por el BIOCEN permiten la conservación del material genético del SARS-CoV-2. Estos resultados sustentaron el Autorizo de Comercialización de los Diagnosticadores por el Centro Estatal para el Control de los Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (CECMED) y su introducción durante la pandemia en la red de diagnóstico molecular del SARS-CoV-2 en el país

-Palabras claves: SARS-CoV-2, medios de transporte de muestras, diagnóstico molecular, almacenamiento, estabilidad material genético, inactivación

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-Resumen: Las enfermedades causadas por Streptococcus pneumoniae son un grave problema de salud mundial, principalmente en niños en edad escolar. Las vacunas actuales se basan en polisacáridos capsulares purificados, que inducen inmunidad protectora específica de serotipo, lo que genera el reemplazo de serotipo, así como una baja respuesta frente al serotipo 3 en las formulaciones que contienen dicho polisacárido. Las vesículas de membrana (VM) se presentan como una alternativa vacunal interesante por su composición multiantigénica, capaz de potenciar la respuesta inmune independiente del serotipo. El objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta de anticuerpos isotipo IgG inducida por VM de S. pneumoniae serotipo 3 (VM-3) en ratones BALB/c, empleando diferentes adyuvantes (AlOH3, Freund) y vías de administración (subcutánea e intramuscular), así como un esquema dosis (5ug/10ug/20ug)-respuesta. Para ello, se establecieron siete grupos experimentales de diez animales cada uno, los cuales recibieron dos inmunizaciones (T0 y T21). Los títulos de anticuerpos IgG anti-VM-3 y la avidez relativa se determinaron mediante ELISA indirecto. La caracterización realizada mostró que las VM-3 purificadas presentaron un tamaño de partículas heterogéneo y un comportamiento estable. Se evidenció la capacidad de las VM-3 de inducir una fuerte respuesta de anticuerpos IgG, que se incrementó en presencia de adyuvantes. Al final del experimento, no se observaron diferencias en la respuesta inducida a dosis crecientes y por diferentes vías de administración. Los altos títulos de IgG específica y de elevada avidez obtenidos sugieren profundizar en el estudio de la formulación de VM-3 adyuvada en Al(OH)3, administrada por vía SC, con vistas a demostrar sus potencialidades inmunológicas como candidato vacunal frente a S. pneumoniae.

-Palabras claves: Streptococcus pneumoniae-vesiculas de membrana-vacunas-serotipo 3

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-Resumen: La continua emergencia de cepas mutantes del SARS-CoV-2 durante la pandemia de COVID-19 suscita preocupación por sus implicaciones para la salud global, tanto en términos del potencial incremento de la transmisibilidad y la letalidad, así como en la reducción de la efectividad de las vacunas y las terapias desarrolladas para su enfrentamiento, por tal motivo el objetivo de este trabajo fue la evaluación de una prueba rápida de SARS-CoV-2 con cepas circulantes en Cuba. Materiales y Métodos: Se prepararon diluciones de 2000, 1000, 500, 100, 50 y 10 TCID de las cepas D6-14G, Beta, Delta y Omicrón circulante en Cuba y se realizaron dos réplicas de cada una en tres tiempos de lectura de la muestra uno, cinco y diez minutos. La concordancia se realize con la Antigen Rapid Test Kit (SAFECARE BIO-TECH). Resultados: Se observó que incluso en la comercial por debajo de 50 TCID 50 /ml no se observa señal visual, se obtuvo una concordancia del 100 % entre ambas pruebas para todas las cepas estudiadas, para todos los tiempos de lectura de la muestra los resultados fueron satisfactorio, demostrándose que un minuto de incubación era suficiente para realizar el ensayo. Conclusiones: Con este estudio realizado se observó que la tira rápida sirve como herramienta para la pezquisa y control de SARS-Cov-2 en el país.

-Palabras claves: Prueba rápida, SARS-CoV-2, Cepas

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-Resumen: Contexto: En respuesta a la necesidad de mantener el trabajo ininterrumpido de los laboratorios de diagnóstico de COVID-19 en Cuba durante el período pandémico, el Centro Nacional de Biopreparados (BIOCEN) desarrolló e introdujo en el país durante 2020, de manera emergente, el BioTransVir-BTV (BTV), un medio de transporte viral para la colección, preservación y traslado de las muestras de exudado nasofaríngeo (ENF) desde el sitio de recolección hasta los laboratorios encargados del diagnóstico. Posteriormente, BIOCEN desarrolló el medio de transporte universal (BTU) que, a diferencia de BTV, emplea materias primas de mayor disponibilidad comercial. Este producto constituyó, entonces, una alternativa más eficiente y con mayor soberanía tecnológica que su predecesor. El UMELISA SARS-CoV-2 Antígeno, desarrollado por el Centro de InmunoEnsayo para el diagnóstico de COVID-19 en los laboratorios SUMA habilitados a tales efectos, evaluó satisfactoriamente el uso del medio BTV durante la etapa de desarrollo del ensayo. Objetivo: Evaluar la incidencia del uso del nuevo medio de transporte viral (BTU) en el desempeño de este diagnosticador, tomando como referencia el medio BTV. Materiales y métodos: Se realizó un estudio comparativo de los resultados del UMELISA en 156 muestras pareadas de ENF tomadas simultáneamente en ambos medios de transporte viral, la confirmación final del resultado fue a través de RT-PCR. Como indicador del desempeño se evaluó la concordancia (Índice Kappa) de los resultados del ensayo con ambos medios de transporte (BTV y BTU) y de éste último con respecto a la prueba confirmatoria (RT-PCR). Además, se evaluó la estabilidad de las muestras en el medio BTU a las 24, 48 y 72 horas de su colecta. Resultados principales: La concordancia en los resultados del ensayo entre ambos medios de transporte fue muy buena (Kappa = 0,90), para un IC de 95%; en tanto los resultados del medio de transporte en evaluación (BTU) respecto a la RT-PCR, mostraron una concordancia de 0,80 (Buena), similar a la alcanzada con el medio de transporte BTV durante la etapa de validación del ensayo. Las muestras de ENF fueron estables en el medio BTU hasta 48 horas después de su colecta, posibilitando un correcto diagnóstico de las mismas. Estos resultados indican que el empleo del medio de transporte viral BTU mantiene las características de desempeño del UMELISA SARS-CoV-2 Antígeno.

-Palabras claves: SARS-CoV-2, UMELISA, Medio de Transporte Viral, COVID-19, diagnóstico.

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-Resumen: Introducción: Las citoquinas, la desmielinización y la degeneración neuroaxonal en el sistema nervioso central son elementos fundamentales implicados en la patogénesis de la esclerosis múltiple (EM) y su modelo no clínico de encefalomielitis autoinmune experimental (EAE). La ficocianobilina (FCB), el cromóforo de la biliproteína C-ficocianina (C-FC) de la Spirulina platensis, ha demostrado acciones antioxidantes, inmunorreguladoras y antiinflamatorias, por lo que podría complementar el efecto de otros Tratamientos Modificadores de Enfermedades (DMT). como el interferón-β (IFN-β). Nuestro principal objetivo fue evaluar los posibles beneficios de los FCB y sus mecanismos de acción para contrarrestar la EAE crónica en ratones. Materiales y métodos: Se implementó EAE inducida por MOG35-55 en ratones hembra C57BL/6. Se evaluaron los signos clínicos, los niveles de citocinas proinflamatorias mediante ELISA, qPCR en el cerebro y la inmunohistoquímica utilizando anticuerpos de células precursoras/oligodendrocitos maduras en la médula espinal. Resultados: FCB mejoró el estado neurológico de los ratones enfermos y disminuyó las concentraciones cerebrales de IL-17A e IL-6, citoquinas proinflamatorias, de una manera dosis dependiente, en comparación con el grupo de EAE tratado con vehículo. Se identificó en el cerebro una actividad reguladora hacia abajo o hacia arriba de FCB a 1 mg/kg en tres (LINGO1, NOTCH1 y TNF-α) y cinco genes (MAL, CXCL12, MOG, OLIG1 y NKX2-2), respectivamente. Curiosamente, se detectó una reducción de la desmielinización, la densidad activa de microglia/macrófagos y daño axonal junto con un aumento en las células precursoras de oligodendrocitos y oligodendrocitos maduros, cuando se evaluaron las médulas espinales de ratones EAE administrados con FCB. Los estudios realizados in vitro en células T encefalitogénicas de roedores e in vivo en el modelo de ratón EAE con la combinación FCB/IFN-β, mostraron un efecto positivo potenciado de esta terapia combinada. Conclusiones: En general, estos resultados demuestran la actividad antiinflamatoria y las propiedades protectoras de FCB sobre la mielina y respaldan su uso con IFN-β como una combinación mejorada de DMT para la EM.

-Palabras claves: Ficocianobilina, Esclerosis Múltiple, encefalomielitis autoinmune experimental, mielina, antinflamatorio

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: El virus SARS-CoV-2 emergido en 2019, ha mutado constantemente en el transcurso de la pandemia, resultando en variantes que difieren del virus original. El surgimiento de Ómicron y los nuevos linajes a nivel mundial, hizo necesario conocer su infectividad en los modelos animales utilizados en los ensayos de inmunogenicidad y reto de las vacunas producidas.
Estudios previos realizados en Cuba demostraron la infectividad de las variantes D614G, Beta y Delta del SARS-CoV-2 en el modelo hámster Sirio Dorado, pero no se disponen de datos para Ómicron; siendo necesario conocer su comportamiento en el modelo animal y establecer las condiciones para los estudios de inmunogenicidad y protección de las vacunas cubanas. Con el objetivo de reproducir una enfermedad similar a la Covid-19 en hámster Sirio Dorado y establecer las condiciones de dosis de inóculo, tiempo de monitoreo de las cargas virales y evolución clínica, se desarrolló un ensayo de infectividad del virus, utilizando diferentes dosis infecciosas de Ómicron (BA1.2) y la variante Delta del SARS-CoV-2.
Se monitoreó durante 7 días, el peso corporal, signos de enfermedad y carga viral por rRT-PCR de los lavados nasofaríngeos y pulmones. Se realizó cultivo viral en células Vero E6 y análisis histopatológico de pulmones.
La investigación demostró que ambas variantes virales produjeron infección en el modelo animal, caracterizada por la significativa pérdida de peso corporal entre los días 3 y 5 post infección y signos clínicos de enfermedad, siendo más evidentes con Delta. Las dosis de inóculos evaluadas no mostraron diferencias significativas entre ellas en cuanto a las cargas virales observadas en nasofaringe y pulmones, en los días 3, 5 y 7 post infección. En el día 7 se observó disminución de la carga viral. Los cultivos virales corroboraron la presencia de virus infectivo en las muestras de lavados nasofaríngeos en los días 3, 5 y 7 post infección. En el día 7, muestras de 3 animales resultaron negativas por cultivo, lo que coincidió con la estabilidad del peso corporal y mejora del estadio clínico, revelando un efecto de recuperación de la enfermedad. Las observaciones macroscópicas de los pulmones en animales infectados evidenciaron focos de necrosis, neumonía, y edema pulmonar. En la histopatología se detectaron alteraciones inflamatorias: focos de necrosis, bronconeumonía de leve a moderada (días 3-5), neumonía de moderada a severa (días 5-7), y edema pulmonar. Los animales sin infectar no evidenciaron signos de infección, ni presencia de virus y no tuvieron alteraciones histopatológicas.
Los resultados permiten concluir que las variantes virales estudiadas con las dosis de inóculo utilizadas, reprodujeron un proceso infeccioso similar a la Covid-19 por lo que pueden emplearse para los ensayos de reto vacunal. Los tiempos seleccionados para el monitoreo de las cargas virales aportaron la información necesaria sobre las condiciones a tener en cuenta en los estudios de inmunogenicidad y protección de la vacuna Abdala y otros candidatos vacunales contra el SARS-CoV-2 en el biomodelo.

-Palabras claves: Infectividad, SARS-CoV-2, modelo animal.

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-Resumen: Context: Anti-SARS CoV-2 Mambisa candidate was developed by CIGB as a needle-free alternative to face COVID-19 disease. This intranasal formulation comprises the recombinant RBD produced in Pichia pastoris yeast and the Hepatitis B virus nucleocapsid antigen. Objective: Given that a significant portion of the Cuban adult population has already been immunized with the Abdala vaccine, it is hypothesized that administering a single intranasal dose of Mambisa will be sufficient to activate memory B cells and produce an effective antiviral antibody response. To test this hypothesis, experiments were conducted on Balb/c mice and Macaca fascicularis monkeys. Materials and methods: The Abdala vaccine was administered to the animals, followed by a booster of Mambisa via the intranasal route approximately seven months later. A thorough analysis of the systemic antibody response was conducted, including anti-RBDp IgG titers, inhibition of RBD-ACE2 interaction, and neutralizing capacity. Safety parameters were also recorded in the monkeys to assess potential adverse events associated with the immunization procedure. Main results: The results showed that a single booster dose in mice with either Mambisa or Abdala immunogen significantly increases serum IgG titer vs RBD according to maximum antibody response elicited after prime three-dose schedule with Abdala. Furthermore, the booster dose elicited a sustained functional antibody response capable of neutralizing both, the D614G strain and the Omicron BA.1 variant of SARS CoV-2. In addition, no severe or serious adverse events were observed during the study period. Conclusions: These results provide evidences to support the use of Mambisa as a booster dose for individuals previously immunized with Abdala vaccine.

-Palabras claves: vaccine, intranasal, RBD, neutralization, SARS CoV-2

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-Resumen: Introduction: Jusvinza is an injectable drug whose active principle is an altered peptide ligand designed by bioinformatics tools from a human 60 KDa heat shock protein epitope. Jusvinza has been used for the treatment of Rheumatoid Arthritis and COVID-19 patients. The Clinical investigations suggest that it could have a regulatory effect on Netosis, a dead typical of neutrophils based on the formation of extracellular traps. Netosis has a microbicide function, but its unregulated increase is related to the incidence of autoimmune and inflammatory diseases. Recent evidences indicate that Jusvinza can reduce LPS-induced Netosis in vitro. In literature have been described a murine model of inflammation characterized for high levels of Netosis and induced by pristane, a hydrocarbon component of the mineral oil.
Objectives: To establish a Netosis-mediated model of peritoneal inflammation with mineral oil in BALB/c mice and the evaluation of the therapeutic effect of Jusvinza in this model.
Materials and methods: For the establishment of the animal model, was used a single injection of mineral oil into the peritoneal cavity of the mice. Intraperitoneal wash samples were collected. The Netosis was identified in these samples by propidium iodide DNA staining and the subsequently fluorescence microscopy at three times: 24 hours, 48 hours, and 7 days. Once the model was established, the effect of Jusvinza was evaluated. It was inoculated by the intraperitoneal route in different schedules.
Main results: Significant Netosis levels were obtained only at 24 hours. Jusvinza reduced the Netosis until levels similar to the healthy mice, without producing a variation in the recruitment of neutrophils.
Conclusions: These preliminary results suggest a regulatory effect of Jusvinza on the Netosis in vivo and propose Jusvinza as a therapeutic alternative in pathologies associated with an increment of Netosis.

-Palabras claves: animal model, Netosis, Jusvinza, neutrophils, inflammation

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-Resumen: Context: Patients with COVID-19 who progress to severe and critical conditions develop hyperimflammation. Jusvinza offers a therapeutic approach to these patients. This molecule is an altered peptide ligand (APL), derived from the cellular stress protein 60 (HSP60). Preclinical studies demonstrated that this peptide has anti-inflammatory effects and increases regulatory T cell frequency. Results from clinical trials with rheumatoid arthritis (RA) patients indicated that Jusvinza was safe and reduced inflammation. As a consequence of these evidences, Jusvinza was repositioned for the treatment of COVID-19 patients with sing of hyperimflammation.
Objective: The aim of this study was to examine specific biomarkers associated with hyperinflammation, in a cohort of COVID-19 patients treated with this peptide.
Materials and methods: Twenty-four patients with COVID-19 in serious or critical condition treated with Jusvinza were enrolled in this study. All critically ill patients were under invasive mechanical ventilation and received the intravenous administration of 1 or 2 mg of Jusvinza every 12 h. Seriously ill patients were treated with oxygen therapy receiving 1 mg of Jusvinza every 12 h and all patients recovered from their severe condition.
Main results: Treatment with Jusvinza improved the clinical condition of all patients, with a significantly decreased of biomarker levels associated with hyperinflammation, such as interleukin (IL)-6, IL-10, tumor necrosis factor (TNF-α), granzyme B, and perforin. We found a significant reduction in hypercoagulation biomarkers and molecular markers associated with neutrophil migration and activity. Furthermore, we observed that Jusvinza induced Tregs in all COVID-19 patients analyzed.
Conclusions: Jusvinza treatment contribute to the restoration of hyperinflammation evidenced by the reduction of inflammation biomarkers and the positive outcome of the patients

-Palabras claves: Jusvinza, COVID-19 , Hyperinflammation

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-Resumen: Introduction: The inhibition of proinflammatory cytokines has been widely used in the management of autoimmune diseases such as Rheumatoid Arthritis (RA). Some of these drugs were repositioned in the treatment of COVID-19 patients. However, controlling hyperinflammation with cytokine inhibitors is still a challenge, because these molecules are redundant and pleiotropic.
The induction of immunological tolerance as a therapeutic approach for autoimmune diseases constitutes a current research focal point. In this sense, we designed and developed a novel therapeutic product called Jusvinza for the control of inflammation associated with RA.
Methods: The active ingredient of Jusvinza is a modified peptide, of the type APL (Altered Peptide Ligand). This peptide is derived from the 60 kDa cell stress protein (HSP60), which acts as a chaperone and is involved in the pathogenesis of several autoimmune diseases.
The APL was designed by bioinformatics tools and is obtained by chemical synthesis. Firstly, a new T cell epitope was identified in the N terminal region from the human HSP60 sequence. Then, the epitope identified was modified in a single amino acid, to increase its affinity with the class II HLA molecules often found in patients with RA.
Results: Preclinical and clinical studies in RA indicated that Jusvinza is safe and reduces inflammation, without causing immunosuppression. This drug can induce mechanisms associated with the restoration of peripheral tolerance and immunological homeostasis. On these bases, Jusvinza was repositioned for the treatment of hyperinflammation that distinguishes patients with COVID-19. Jusvinza’s treatment decreases the concentration of cytokines and induces the increase of regulatory T cells in various experimental systems. Furthermore, it decreases soluble mediators that are raised in RA, as well as decreasing the excessive inflammatory response induced by SARS-CoV-2.
Conclusions: The anti-inflammatory effect of Jusvinza constitutes an attractive therapeutic approach for a wide variety of diseases, characterized by inflammation and high levels of proinflammatory cytokines, such as autoimmune diseases, COVID-19, atherosclerosis, and acute respiratory distress syndrome.

-Palabras claves: Jusvinza, autoimmune diseases, Rheumatoid Arthritis, COVID-19, hyperinflammation

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-Resumen: Introduction: Blood HBsAg detection is characteristic of chronic hepatitis B (CHB). The phase IV study assess the long-term effect of HeberNasvac treatment in CHB patients and specifically their impact on HBsAg levels. Reduction in serum HBsAg is associated to a lower disease progression and HBsAg loss is considered a functional “cure”. Our preliminary study evaluates HeberNasvac impact on HBsAg levels on time, before and after the last extraction available.

Materials and Methods: Samples from 146 vaccinated CHB patients were analysed over a period of 6 months to 3 years follow-up. The quantification of HBsAg levels was carried out using the non-competitive ELISA technique with Ab fixed to the solid phase (direct sandwich method). For this purpose, the monoclonal antibodies specific for HBsAg Hep1 and Hep4 were used to coat the plate, and the CB.HepB4/HRP conjugate as a detection reagent. OPD and hydrogen peroxide substrates were used to reveal the ELISA reaction and the plate was read at 492nm.

Results: The preliminary results after 3 years follow-up evidenced a significant decrease in the levels of HBsAg in blood. The drop was evident in most of the patients evaluated. Said reduction is progressive in time. The results are consistent with the previous results in the state of the art with this product. In addition; a proportion of patients (14,4%) resulted in HBsAg loss suggesting that the product may induce competitive effect compared with other treatments in the literature that only reach HBsAg elimination levels in the range of 0 to 10% depending on patient genotype and/or treatment.

Conclusions: These results allow us to conclude, preliminarily, that HeberNasvac immunotherapy in CHB patients constitutes a safe therapeutic option and that it can decrease HBsAg levels in a progressive and significant extent.

-Palabras claves: HeberNasvac, chronic hepatitis B (CHB), surface antigen(HBsAg), therapeutic vaccine.

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-Resumen: Contexto: La Sífilis es una infección crónica sistémica, caracterizada por varias etapas bien definidas. Para establecer su diagnóstico se requiere de pruebas directas e indirectas, entre estas últimas se destacan las pruebas serológicas, tanto las no treponémicas como las treponémicas. Los métodos inmunenzimáticos (UltraMicroELISA), se encuentran dentro de las pruebas treponémicas que detectan la presencia de anticuerpos específicos contra Treponema pallidum en muestras de pacientes que se encuentran en diferentes estadios de la enfermedad. Objetivos: Con este fin evaluamos de forma independiente y en mezcla tres péptidos sintéticos, correspondientes a una proteína de membrana y a los antígenos p15 y p47 de la bacteria. Materiales y métodos: Se determinó la concentración de trabajo de los péptidos independientes y en mezcla se evaluaron muestras positivas y negativas. Resultados: La mezcla de péptidos sintéticos obtuvo un 93,15 % de sensibilidad y un 93,46 % de especificidad, con un índice Kappa de 0,83 para una muy buena concordancia. No obstante, se debe realizar un estudio poblacional para determinar la zona gris y el nivel de corte del posible ensayo. Conclusiones: Estos resultados preliminares nos sugieren que estos péptidos sintéticos pueden ser utilizados en el desarrollo de un ensayo UltraMicroELISA para detección de anticuerpos de tipo IgG contra el Treponema pallidum.

-Palabras claves: Péptido, Treponema pallidum, Sífilis, diagnóstico, UltraMicroELISA

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-Resumen: Cuba is facing a severe COVID-19 outbreak despite its efforts to contain the virus and vaccinate its population. In this paper, we present a computational analysis based on a modified multi-population compartmental model of susceptible, infected, and recovered (SIR model) that can simulate the evolution of the pandemic in Cuba under different scenarios and interventions. We used the model to evaluate the impact of the vaccination program on the daily number of infections, considering vaccine efficacy and coverage. We also compare the outcomes of different measures on the dynamics of transmission. Our results show that while vaccination can significantly reduce the number of infections and deaths, it must be combined with other non-pharmacologic interventions to achieve optimal control of the pandemic. We discuss the implications of our findings for public health policy and future research.

-Palabras claves: Epidemiology, Dynamical systems, mathematical models, vaccination, COVID-19.

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-Resumen: The development of new vaccine candidates against SARS-CoV-2 capable of inducing long-lasting protective immunity against existing viral strains and those that may emerge in the future is currently a high priority task for the scientific community. It is well known that the receptor binding domain (RBD) in the S1 subunit of the S protein of SARS-CoV-2 is one of the main targets of the neutralizing antibody response against this pathogen. For its part, the nucleocapsid (N) protein is highly conserved among coronaviruses and induces a long-lasting T cell immune response. In this study we evaluated the immunogenicity in BALB/c mice of formulations that include the RBD protein obtained as a recombinant protein in the yeast Pichia pastoris and the N protein obtained in E. coli, administered intranasally and using the nucleotide adjuvant di-adenosine cyclic monophosphate (dAMPc). It has been reported that this adjuvant enhances the induction of specific humoral and cellular immune responses following mucosal administration in preclinical studies. As results of the study, the induction of IgG antibodies in serum against each recombinant protein is demonstrated. Furthermore, these antibodies were capable of inhibiting the interaction of the RBD with the cellular receptor ACE2. The induction of IgA antibodies against RBD and N in nasopharyngeal washings and the induction of an immune response of specific IFNg-secreting cells to both antigens included in the formulation are also demonstrated. Finally, the ability of the dAMPc adjuvant to enhance the humoral and cellular immune response in mice is corroborated.

-Palabras claves: SARS-CoV-2
vaccine
dAMPc

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-Resumen: El neumococo o Streptococcus pneumoniae es un microorganismo patógeno capaz de causar en humanos diversas infecciones y procesos invasivos severos. Se trata de una bacteria grampositiva de 1,2-1,8 µm de longitud, que presenta una forma oval y el extremo distal lanceolado. Es inmóvil, no forma endosporas, y es un miembro alfa-hemolítico del género Streptococcus.Actualmente existen dos tipos de vacunas antineumococcicas licenciadas las polisacaridicas planas y las conjugadas, las cuales presentan limitaciones. Las vesículas de membrana (VM) se presentan como una alternativa vacunal interesante por su composición multiantigénica, capaz de potenciar la respuesta inmune independiente del serotipo. El objetivo de este trabajo Obtener y caracterizar vesículas de membrana de Streptococcus pneumoniae serotipo 3 y evaluación inmunológica de combinaciones de vesícula de Sp 3 con conjugados de neumococo. Para ello se establecieron 10 grupos experimentales de 10 animales cada uno, los cuales recibieron dos inmunizaciones (T0 y T21). Se emplearon para este ensayo ratones BALBC/c y se utilizaron como adyuvante AIPO4 y vías de administración intramuscular, en un esquema dosis (5ug)-respuesta. Los títulos de anticuerpos IgG anti-VM-3 se determinaron mediante ELISA. Para evaluar la capacidad protectora de la vesícula frente a otras cepas del serotipo 3 de Sp se enfrentaron los ratones a un ensayo de reto con la cepa 3319 y 3798 obtenida del IPK. Para determinar la dosis letal infectiva se obtuvo la DL50 tanto para la cepa 3798 como para la cepa 3319. La caracterización realizada mostró que las VM-3 purificadas libres de detergentes presentaron un tamaño de partículas heterogéneo y un comportamiento estable.

-Palabras claves: Streptococcus pneumoniae vacunas vesículas de membrana

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-Resumen: The Mambisa vaccine candidate, using the nasal route of immunization, is a highly attractive boosting agent addressed to improve the neutralizing humoral response to SarsCov 2 in mucosal and systemic environments controlling the replication and shedding of the virus in the upper respiratory track. Although COVID-19 epidemic is controlled now, the evidence of a natural and vaccine waning immunity in this disease and the constant emergency of variants of concern, make essential the boosting strategy. Objective: This study evaluate the immune response anti-SARSCov-2 induced with two strengths of Mambisa vaccine candidate in rats previously immunized with Abdala vaccine. Materials and methods: Spragle Dawley rats were immunized in a first round, with three doses of Abdala vaccine or PBS. Once the anti-RBD response wanes, the animals received in a second round of immunization one dose of Mambisa vaccine by intranasal route with two different strengths. Results: After the booster dose of Mambisa, the systemic anti-RBD humoral response was detected, showing a significant increase in vaccinated rats with respect to placebo groups. Additionally the ability of the sera to inhibit the binding of RBD to ACE2 was measured, as an indicator of neutralizing potential, showing an increase after the administration of this mucosal vaccine candidate, in the frequency of animals with more than 50 % of inhibition index. When comparing both strengths of Mambisa used, no significant differences were detected between the titers achieved at the same times after the administration of the booster dose, which suggests that any of them can enhance the anti-RBD response. Conclusion: The study shows an increase in the functional anti-RBD response (both in magnitude and quality of the response) with the administration of a single dose of the Mambisa vaccine candidate more than 6 months after vaccination with Abdala.

-Palabras claves: COVID-19, recombinant vaccine, nasal vaccine, RBD , booster dose

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-Resumen: The development of mucosal vaccines was largely limited by the lack of suitable adjuvants and the possible neurotoxic effects. Before COVID-19, only one mucosal vaccine was on the market. The accelerated technological development and regulatory flexibility during the pandemic gave new impetus to this immunization route. Some 20 vaccine candidates have reached clinical studies and five obtained EUA. The development of the HeberNasvac nasal vaccine against chronic hepatitis B, registered in Cuba in 2015, served as the basis for developing the Mambisa vaccine candidate against SARS-CoV-2.
HeberNasvac contains 100 µg of hepatitis B surface antigen (HBsAg) and 100 µg of hepatitis B nucleocapsid antigen (HBcAg). 1
The immune potentiating capacity of the HBcAg combined with RBD protein was used to formulate the mucosal vaccine Mambisa containing 50 µg of RBD and 40 µg of HBcAg. 2
In the phase II clinical trial, Mambisa was administered to 519 convalescent individuals stratified in subjects younger and older than 60 years. 2
The generation of mucosal tissue-specific TRM cells was evaluated in an independent group of volunteers.
One dose of the Mambisa vaccine administered in previously infected individuals induces high levels of specific serum IgG. The serum antibodies show RBD-ACE2 binding inhibition capacity and neutralization activity against the live virus D614G, and also against the Omicron variant of concern.
Only Mambisa, not the systemic vaccine against SARS-CoV-2 used as a control, can induce mucosal-specific TRM cells.
Nasal immunization exhibits advantages in inducing immunity at the level of the nasopharyngeal mucosa in addition to the systemic response. The elderly population could obtain additional advantages of mucosal immunization.
References:
1. Mamun Al Mahtab, et.al. Treatment of chronic hepatitis B naïve patients with a therapeutic vaccine containing HBs and HBc antigens (A randomized, open and treatment-controlled phase III clinical trial). 2018. PLoS ONE 13(8): e0201236.https://doi.org/10.1371/journal. pone.0201236
2. Cuban Public Registry of Clinical Assays. Mambisa Study Available at: https://www.rpcec.sld.cu/trials/RPCEC00000345-En

-Palabras claves: nasal vaccine, mucosal immunity, TRM cells, COVID-19

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-Resumen: Contexto: La sepsis es una complicación potencialmente letal, dada por una reacción sistémica exagerada a la infección. Representa una respuesta hiperinflamatoria a la injuria, seguida de una fase de inmunodepresión, donde se presenta disfunción de órganos. Se han investigado numerosos biomarcadores para evaluar la severidad de la sepsis, estimar el pronóstico, guiar el tratamiento antibiótico, evaluar la respuesta al tratamiento y predecir complicaciones.
Objetivo: Evaluar la precisión de los biomarcadores celulares para la estimación del riesgo de muerte en pacientes con sepsis.
Materiales y métodos: Se realizó un estudio prospectivo (enero 2028 a diciembre 2021) en 213 pacientes con sepsis ingresados en la unidad de cuidados intensivos (UCI) del Hospital Hermanos Ameijeiras. Se excluyeron los pacientes con estadía en UCI < 24 horas y los que presentaron neutropenia severa. Al ingreso se recolectaron las variables demográficas, clínicas y las relacionadas con los biomarcadores celulares. Se utilizó el área bajo la curva de las características operativas del receptor (ABC) para evaluar la precisión en la estimación del riesgo de muerte hospitalaria.
Resultados principales: La sepsis nosocomial fue la más frecuente (88,7%); la mayoría de los pacientes presentó sepsis de origen intraabdominal (40,2%) y pulmonar (26,8%). El choque séptico se observó en el 30,5% de los casos y el 44,6% requirió apoyo ventilatorio. La mortalidad fue del 46,9%. La mejor precisión se encontró para el índice neutrófilo/linfocito (ABC 0,78) y para el índice leucoglicémico (ABC 0,72). El ABC para los otros biomarcadores celulares explorados fue de 0,69, 0,65, 0,62, 0,60, 0,55 y 0,46 para el conteo absoluto de linfocitos, el índice albúmina/linfocito, el índice plaqueta/linfocito, el conteo absoluto de neutrófilos, el conteo total de leucocitos y el conteo total de plaquetas, respectivamente. Con un valor de corte de 4,3 células/mm3, el índice neutrófilo/linfocito tuvo una sensibilidad de 76%, especificidad de 70%, valor predictivo positivo de 69,1% y valor predictivo negativo de 76,7%. Con un valor de corte de 2850 células*g/mm3L, el índice leucoglicémico tuvo una sensibilidad de 73%, especificidad de 70,8%, valor predictivo positivo de 68,8% y valor predictivo negativo de 74,8%.
Conclusiones: Los biomarcadores celulares predicen modestamente la mortalidad hospitalaria en los pacientes con sepsis. Se requiere complementar la información que ofrecen los biomarcadores celulares con la de los biomarcadores humorales y las características clínicas para mejorar la estimación pronóstica de estos pacientes.

-Palabras claves: biomarcador; disfunción de órgano; mortalidad; sepsis; choque séptico

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-Resumen: Contexto: La pandemia causada por el coronavirus SARS-CoV-2 sigue siendo una situación de vigilancia mundial. Sin dudas, la vacunación ha tenido un alto impacto en el control y mitigación de la enfermedad. La aparición de variantes como Ómicron, en el panorama epidemiológico puede impactar no sólo en la generación de anticuerpos neutralizantes sino también en la respuesta T específica. Este escenario obliga a estudiar el efecto de las variantes en la inmunogenicidad de las vacunas cubanas SOBERANA® basadas en el dominio de unión al receptor (RBD) de la proteína de superficie espiga del virus.
Objetivo: Predecir in silico los epítopos de células T en la secuencia RBD de las vacunas SOBERANA® conservados en la variante Ómicron y sus subvariantes.
Materiales y métodos: Se obtuvo la secuencia de la proteína espiga del virus SARS-CoV-2 de la variante salvaje Wuhan (hCoV-19/Wuhan/WIV04/2019 (WIV04)), y se empleó para obtener la secuencia correspondiente al RBD. Con esta secuencia se realizó la predicción de epítopos de células T, empleando las herramientas NetMHCpan-4.1a y NetMHCIIpan-4.0 con respecto a los alelos más frecuentes de la población cubana. A partir de las mutaciones puntuales descritas en CoVariants se conformaron las secuencias correspondientes al RBD de las catorce subvariantes de Ómicron. Y se empleó la herramienta Epitope Conservacy Analysis para determinar la conservación de los epítopos, considerando solo aquellos con un 100% de identidad en la secuencia.
Resultados principales: La predicción resultó en 19 epítopos de células T presentes en la secuencia vacunal, de ellos 13 MHC-I y 6 MHC-II. En el caso del MHC-I, 7 epítopos se conservan en todas las variantes analizadas, mientras 4 epítopos se conservan en cierto grado, pero no en todas las variantes, y dos no se conservan en ninguna al 100% de identidad. Los epítopos de MHC-II son menos conservados, con solo uno que se conserva al 100% en todas las variantes analizadas, uno se conserva en todas menos una, uno se conserva en solo una variante y 3 no se conservan en ninguna. Estos epítopos no aparecen en todos los alelos de MHC siendo los HLA A*03:01, A*24:02, B*07:02 los alelos predominantes en MHC-I y HLA -DRB1*15:01 en MHC-II.
Conclusiones:. Los epítopos de células T, de acuerdo a la predicción realizada, se conservan solo en un nivel medio en el caso del MHC-I, y tienen poco nivel de conservación en el MHC-II. El estudio inmunoinformático realizado sugiere la necesidad de evaluar in vivo el posible declive de la respuesta celular de las vacunas SOBERANA® frente a las variantes del SARS-Cov-2.

-Palabras claves: Ómicron, Cuba, vacunas, células T, epítopos,predicción, inmunoinformática

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-Resumen: Contexto: El Treponema pallidum es una bacteria patógena, responsable de la enfermedad infecciosa: la sífilis. Su transmición fundamental es por contacto sexual, y según datos de la Organización Mundial de la Salud (OMS), anualmente se producen más de 12 millones de casos de sífilis en el mundo. Para el diagnóstico de la sífilis existen pruebas serológicas (treponémicas o no treponémicas). Entre las pruebas treponémicas se encuentran los ELISA. Objetivo: Síntesis química de sitios antigénicos, detectados mediante herramientas bioinformáticas, de las proteínas, tpp 47, TMPA, tpp 15 y tpp 17 de la bacteria T. pallidum. Materiales y métodos: La síntesis química de los péptidos se realizó en fase sólida, empleando la metodología Fmoc, previamente in silico se realizó la identificación de las secuencias del T. pallidum, el alineamiento múltiple de las secuencias, la predicción de regiones antigénicas de las proteínas, el estudio de las propiedades físico-químicas de los aminoácidos, la modelación en 3D de secuencias proteícas, la predicción de regiones con alfa hélices, láminas betas y otras estructuras secundarias. Resultados: De cada una de las proteínas del T. pallidum se obtuvieron secuencias sintéticas monoméricas, con rendimientos entre el 45-80 %. Conclusiones: La factibilidad de la síntesis y el rendimiento de los péptidos predichos como altamente antigénicos sugieren que puedan ser empleados para el desarrollo de un ensayo diagnóstico para la sífilis.

-Palabras claves: péptidos sintéticos, sífilis, treponema, diagnóstico, metodología Fmoc

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-Resumen: HeberNasvac, a therapeutic vaccine for chronic hepatitis B, is able to safely stimulate major interferon stimulated genes (ISG) in a phase II clinical trial (Profira), in elderly volunteers, household contacts of respiratory infection patients. Thus, a new indication as a post exposure prophylaxis or early therapy of respiratory infections has been proposed. In this study, we evaluated the expression of several ISGs after the mucosal administration of HeberNasvac and compared this effect with the nasal delivery of interferon alpha 2b (Nasalferon). Molecular studies in blood samples of fifty subjects from the Profira clinical trial locally treated with HeberNasvac or Nasalferon and untreated individuals were compared in their relative mRNA expression of genes OAS1, ISG15, ISG20, STAT1, STAT3 and DRB1-HLA II gene. In most cases, the gene expression induced by HeberNasvac was similar in profile and intensity to the expression induced by Nasalferon, and significantly superior to the untreated controls. The immune-stimulatory effect of HeberNasvac on ISGs paved the way to its future use as an innate immunity stimulator in elderly persons and immuno-compromised subjects or as part of Mambisa, a nasal SARSCoV2 preventive vaccine.

-Palabras claves: HeberNasvac,CIGB2020,innate inmmunity stimulation, ISG.

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-Resumen: Introducción: La aparición de múltiples variantes de preocupación del SARS-CoV-2, que albergan mutaciones en la proteína de la espícula, principal diana de los anticuerpos neutralizantes, ha generado interrogantes sobre la posibilidad de reducir la eficacia protectora de las respuestas humorales provocadas por la vacunación. El objetivo de este trabajo es determinar la efectividad de las vacunas SOBERANA® en población pediátrica, frente a las variantes de preocupación del SARS-CoV-2. Materiales y métodos: Los niveles de anticuerpos neutralizantes mediante el ensayo de micro-neutralización con virus vivo estandarizado y validado en el Centro de Investigaciones Científicas de la Defensa Civil. Se determinaron los niveles de anticuerpos neutralizantes en suero de individuos inmunizados con las vacunas SOBERANA® contra las variantes del SARS-CoV-2: B1.1.7 (alfa), B1.351 (beta), B1.617.2 (delta) y BA1.21K (omicron); que se compararon con los niveles de anticuerpos neutralizantes frente a la cepa D614G, aplicando el estadígrafo de Friedman y el ensayo de comparación múltiple de Dunn. Resultados: Se observó una reducción significativa de la media de los títulos neutralizantes de 10,3 veces frente a la variante Beta (p=0.0019); 2,6 veces frente a Delta (p=0.0424) y 2,2 veces frente al linaje de Omicron BA1.21K (p=0.0293), con respecto a los de la cepa D614G. No existieron diferencias significativas entre los títulos neutralizantes de D614G con la variante Alfa. Estos resultados resaltan la importancia del monitoreo sostenido de las variantes virales del SARS-CoV-2 y la evaluación de la eficacia protectora de las vacunas. Conclusiones: Los anticuerpos generados por las vacunas SOBERANA® son capaces de garantizar un adecuado nivel de protección en la población pediátrica frente a las variantes de preocupación del SARS-CoV-2 circulantes en nuestro país.

-Palabras claves: SARS-CoV-2, vacunas SOBERANA®, población pediátrica, variantes de preocupación, anticuerpos neutralizantes

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-Resumen: El Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología de Sancti Spíritus (CIGB SS) ha desarrollado una plataforma productiva basada en el conocimiento científico, la innovación tecnológica y las Buenas Prácticas de Fabricación Biomédicas; para la generación de anticuerpos monoclonales, policlonales, expresión de proteínas recombinantes y el desarrollo de medios de diagnóstico. El CIGB SS tiene experiencia en diseñar, desarrollar, optimizar y validar inmunoensayos aplicados al diagnóstico, la investigación-desarrollo, producción y liberación analítica de productos farmacéuticos y vacunas utilizadas en el control y prevención de enfermedades infecciosas y autoinmunes. Todo ello cumpliendo los más altos estándares regulatorios. Entre las principales líneas de trabajo del CIGB SS está la generación de anticuerpos monoclonales utilizados en la liberación analítica de productos líderes de la biotecnología como Heberprot-P, Abdala, Soberana, Nasalferon, Heberon Alfa R, HeberFERON y el diagnóstico de enfermedades infecciosas como Covid-19 (UMELISA SARS-CoV-2 IgG e IgM, UMELISA anti SARC-Cov-2 antígeno), Virus de la Hepatitis B (UMELISA anti HBsAg), Dengue (UMELISA DENGUE IgM PLUS). El hecho de contar con herramientas analíticas imprescindibles para el diagnóstico biomédico y la liberación de biomoléculas, fabricados bajo la licencia de las autoridades regulatorias (CECMED), evita la importación de ensayos comerciales y permite brindar mejores productos y servicios a nuestros clientes.

-Palabras claves: Diagnóstico, enfermedades infecciosas y autoinmunes, reactivos biológicos, Anticuerpos monoclonales y policlonales

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-Resumen: Zika virus infection continues to be a global concern for human health due to the high-risk association of the disease with neurological disorders and microcephaly in newborn. Nowadays, no vaccine or specific antiviral treatment is available, and the development of safe and effective vaccines is yet a challenge. In the pipeline of vaccine development, based on subunit protein vaccines are attractive as a non-replicating platform, due to their potential safe use in all populations, including pregnant women. Nevertheless, the main disadvantage of this approach is that frequently they are less immunogenic than others vaccine candidates. To overcome this drawback, usually multiple doses are required and inclusion of adjuvants to achieve protective immunity.
In this study, we summary all work in the obtaining a novel subunit vaccine that combines two regions of the zika genome. Firstly, using human samples collected during a zika virus outbreak in Cuba, we isolated the virus to design the recombinant construction ZEC, which contain the genetic regions encoding for the domain III of the envelope and the capsid of the virus. The recombinant protein ZEC was characterized using polyclonal anti-ZIKV and anti-DENV antibodies that verify the specificity of the molecule by in vitro assays. Also, blood peripheral mononuclear cells from zika immune donors stimulated with the ZEC recombinant antigen showed the capacity to recall the memory T cell response previously generated by the natural infection. Taking to account the structural and antigenic properties of chimeric protein ZEC we evaluate the capacity to self-assemble after combination with nucleotides compounds to form aggregates. Two animal studies are presented in this work. In a first study, we demonstrate that the immunization of BALB/c mice with aggregated and not aggregated form of the protein ZEC showed a similar humoral immune response, although the aggregated variant induced more cell-mediated immunity evaluated by in vitro IFN secretion.
In the second study, we evaluate the immunogenicity of the protein ZEC, when a specific oligonucleotide (ODN 39M) or bis-(3,5)-cyclic dimeric adenosine monophosphate (c-di-AMP) were incorporated in vaccine formulations, combined with aluminum hydroxide. Afterward immunizations, all formulations elicited high levels of total IgG. However, IgG subtypes suggesting a predominantly Th1-biased humoral immune response by formulation including ODN 39M, compared to formulation that incorporated c-di-AMP. In addition, the cellular immune responses, measured by IFN secretion of spleen cells after in vitro stimulations, were promoted by the combination with the immunomodulators c-di-AMP or ODN 39M. Together these results, corroborating the ability of both immunomodulators to improve the immunogenicity of the recombinant protein ZEC as vaccine candidate against ZIKV. Based on these evidences, we propose a novel vaccine candidate against the zika disease that can stimulate both arms of the immune system.

-Palabras claves: vaccine, zika virus, recombinant protein, neutralizing antibodies, cell-mediated immunity

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-Resumen: Context: Itolizumab is a humanized monoclonal antibody specific for human CD6, developed at the Center of Molecular Immunology in Havana, Cuba. Although CD6 expression has been correlated with human autoimmune diseases, only a few therapeutic approaches are exploring this molecule as target in the clinic.
General Objective: To evaluate the safety and effect of itolizumab in patients with autoimmune diseases (rheumatoid arthritis or psoriasis).
Methods: Two small open-label (non-controlled, dose-finding) phase 1 trials with the humanized mAb, itolizumab, were conducted in patients with active moderate-to-severe rheumatoid arthritis, who had failed to respond adequately to previous disease modifying therapies. The treatment was based on six or 12 weekly doses of the antibody as monotherapy. In both studies, a full set analysis was done one week after the last dose using an ACR20 response rate (American College of Rheumatology criteria for 20% improvement). On the other hand, 170 patients with active, moderate-to-severe psoriasis were given itolizumab as intravenoulous monotherapy (1.6 mg/Kg) for at least 24 weeks. The clinical response was evaluated employing the Psoriasis Area and Severity Index-75 (PASI-75 means at least 75% improvement in the psoriasis area and severity index score from baseline) after 12 weeks of therapy.
Main results: Both studies in patients with rheumatoid arthritis showed that over 50% of the subjects achieved an ACR20 response rate. The majority of patients with active, moderate-to-severe psoriasis attained a significant improvement in PASI-75. Over time, a high level of response was maintained with itolizumab administration every 4 weeks, suggesting that a long-term benefit can be achieved. The most commonly reported drug-related adverse events have been fever, headache, chills and nausea. The majority of adverse events were of mild or moderate severity. No treatment-related serious adverse events have been reported, nor treatment-related severe adverse events have resulted in reduction of drug dosage.
Conclusions: The clinical studies have demonstrated that humanized mAb itolizumab has favorable clinical effects and a safety profile when used as monotherapy in patients with rheumatoid arthritis and psoriasis.

-Palabras claves: Autoimmune diseases, itolizumab, psoriasis. rheumatoid arthritis

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-Resumen: Context: The combination of IFN alpha and gamma (HeberFERON) has been proven to be safe for human. Several literature data refered antiviral synergism of both IFNs in Corona virus infection. For that reasons the formulation was selected for a clinical trials in infected SARS-CoV-2 virus.
General Objective: To evaluate the effect and safety of subcutaneous administration of HeberFERON (combination of IFN-α2b and -) and Heberon (IFN-α2b) in patients confirmed to have SARS-CoV-2 infection.
Methods: In the ESPERANZA study we enrolled 19-82 years-old inpatients at the Military Central Hospital Luis Diaz Soto, Havana, Cuba. They were hospitalized after confirmed diagnosis for SARS-CoV-2 RNA by RT-PCR. Patients were randomly assigned to receive either; subcutaneous HeberFERON, or thrice a week intramuscular Heberon® Alpha R. Additionally, all patients received lopinavir-ritonavir. The protocol was approved by the Ethics Committee on Clinical Investigation from the Hospital and the Center for the State Control of Medicines, Equipment and Medical Devices in Cuba. Informed consent was obtained from each participant (INSTITUTION PROTOCOL IG/IAG/CV/2001). The STOP study evaluated patients with laboratory-confirmed SARS-CoV-2 previously treated with Heberon Apha R that resulted with prolonged viral shedding. All patients received lopinavir-ritonavir.
Main results: A total of 134 patients with laboratory-confirmed SARS-CoV-2 infection underwent randomization. Seventy-one subjects received HeberFERON, and sixty-three, Heberon Alpha R. A significant improvement in the reduction of time for virus elimination was attributable to HeberFERON (p=0.0104, Log-rank test) with a Geha-Breslow-Wilcoxon test of 0.0014 and 95% CI of 1.215 to 4.306, as compared to the Heberon Alpha R treated group. The study also identified an early anti-inflammatory of HeberFERON on patients where parameters associated with progression to severity such as the ratio between neutrophil and lymphocyte concentration (NLR) and systemic immune inflammation index (NLR*PLT). During the study, no patient progressed to severe disease status. Worsening of symptoms was detected in 3 (4.8%) of the patients in the HeberFERON® group and in 1 (1.7%) in the control group. The percentage of recovered patients (PCR negative after 14 days or less) in the HeberFERON® group was 96.8% and in the control group 88.5%, in accordance with the results of early virus negativization.
In the STOP Study, patients with viral persistence to treatment with HEBERON Alfa R® and who were later treated with HeberFERON® show a median time to become negative of 3 days. 68% of these patients became negative with just one administration of HeberFERON®, between 1-4 days from the start of treatment. Patients with viral persistence treated with HeberFERON® showed 90.2% recovery. Meanwhile, in the ESPERANZA study, 96.8% of patients treated with HeberFERON® recovered, which demonstrates the capacity to eliminate SARS-CoV-2 by HeberFERON, even in patients with viral persistence. These results allowed obtaining the sanitary register for HeberFERON in high risk patient with COVID-19.
Conclusions: The use of HeberFERON in patients infected with SARS-CoV-2 at diagnosis or resistant to IFN treatment resulted in an effective negativization of the viral infections.

-Palabras claves: COVID-19, virus elimination, antiviral, interferon combination, SARS CoV-2

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-Resumen: Después de tres años desde el inicio de la administración de diversas plataformas vacunales para controlar la propagación del SARS-CoV-2, aún se desconoce la respuesta inmune humoral generada en la leche materna por las vacunas de subunidades proteicas, específicamente contra variantes del virus que difieren de la cepa original Wuha-Hu-1. En este trabajo investigamos la presencia de anticuerpos contra Omicron BA.5 RBD en la leche materna de puérperas vacunadas con tres dosis de la vacuna de subunidad proteica Abdala, basada en el RBD Wuhan-Hu-1. Se recolectaron muestras de leche materna entre septiembre y principios de noviembre de 2021, de 104 puérperas, 5 y 9 semanas post-vacunación con tres dosis de Abdala. Los títulos de anticuerpos contra Omicron BA.5 RBD y Wuhan-Hu-1 RBD se evaluaron simultáneamente en la misma placa ELISA mediante un protocolo casero. Se evaluó la relación de los títulos de anticuerpos con el estado de salud y la paridad de los participantes. Se detectó la unión de Omicron BA.5 RBD a anticuerpos IgA e IgG y sus títulos fueron significativamente más bajos que contra Wuhan-Hu-1 RBD. Las enfermedades crónicas y la multiparidad disminuyeron los títulos de anticuerpos contra ambos RBD. Este es el primer informe de detección simultánea de títulos de anticuerpos, contra RBDWuh y RBDOmic, en la leche materna de puérperas vacunadas con una vacuna de subunidad proteica COVID-19, basada en la RBD Wuhan-Hu-1. Una de las razones detrás de esta respuesta inmune puede estar relacionada con la glicosilación de la RBD de Abdala, expresada en Pichia pastoris, que contribuye a la inmunogenicidad de la RBD. El impacto de la glicosilación de Abdala RBD podría estar en la exposición de epítopos que se conservan en variantes pandémicas, como Omicron.

-Palabras claves: puéperas, RBD Ómicron BA.5, vacuna Abdala, título de anticuerpos

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-Resumen: Los productos preparados a partir de sangre humana pueden provocar transmisión de virus como el virus de la hepatitis B (VHB), la hepatitis C (VHC) y virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). El suministro de una materia prima segura, requiere políticas, regulaciones y la implementación de pruebas confiables que detecten marcadores tempranos de infección; sin embargo se ha comprobado que puede quedar un riesgo residual de transmisión viral por diferentes causas, una de ellas es el período de ventana. El avance en las técnicas de Biología Molecular hasta llegar al empleo de la PCR en tiempo real, hace que se recomiende el uso de esta técnica en la certificación de hemoderivados, como parte de la mejora continua de este proceso Se exponen los resultados de la validación de los estuches comerciales de PCR en tiempo real SUMASIGNAL VHC y SUMASIGNAL VHB (un paso) con muestras de Extracto Ultrafiltrado Leucocitario (EUL). Materiales y métodos: Se realizó una validación prospectiva para los ensayos moleculares en tiempo real SUMASIGNAL VHC y SUMASIGNAL VHB (un paso); utilizando muestras de EUL, que se encuentran fuera de su alcance, por lo que se aplicaron los requerimientos para un ensayo de identidad: especificidad, límite de detección y robustez. Se realizaron a su vez estudios de concordancia con un sistema de referencia. Resultados: Se obtuvo 100 % de especificidad. El LD al 95 % fue de 28 UI/mL para SUMASIGNAL VHC y 350 UI/mL para SUMASIGNAL VHB (un paso). Las pequeñas modificaciones en los procedimientos de ensayo mostraron que ambos estuches son robustos. El por ciento de concordancia total con los estuches de referencia fue de 100%. Conclusiones: La validación de estos ensayos, en muestras de EUL, permite disminuir el período de ventana para la detección de marcadores virales en el proceso de certificación del EUL, brindando mayor seguridad para su uso.

-Palabras claves: SUMASIGNAL, extracto ultrafiltrado leucocitario, validación, virus, hemoderivados

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-Resumen: El estudio de marcadores virales al VIH y hepatitis B y C es una de las medidas de seguridad recomendadas para garantizar su control y reducir los riesgos de trasmisión de agentes patógenos por esta vía. Los sistemas comerciales empleados en estos ensayos, que no incluyen dentro de su campo de aplicación muestras de productos Hemoderivados, requieren su validación antes de su empleo. El Laboratorio Nacional de Referencia para el diagnóstico de retrovirus (LISIDA) es el laboratorio designado por el CECMED para realizar el control analítico de los marcadores virales de los Hemoderivados y ha establecido los algoritmos de ensayo. El objetivo del trabajo es validar los estuches de HIV Ab&Ag, HBsAg y HCV Ab DIAPRO con muestras de estos productos. Materiales y Métodos: Se verificaron los parámetros de los ensayos establecidos por el productor para cada diagnosticador. Se analizó la concordancia de 65 lotes de productos Hemoderivados, aprobados en el Laboratorio de Control de la Calidad del LISIDA en el año 2022 con los métodos de referencia de ELISA de la firma CTK BIOTECH. Se evaluó la especificidad y la sensibilidad analítica. Para evaluar la sensibilidad diagnóstica se emplearon cinco paneles de referencia de VIH, 20 muestras positivas a VHC y 20 al VHB pertenecientes al Banco de muestras de LISIDA. Resultados: Se cumplieron los criterios de ensayo especificados por el productor. Se obtuvo 100% de concordancia con los métodos de referencia, la sensibilidad analítica en los tres sistemas de ELISA estudiados, demostró que pueden detectar una bolsa de plasma reactiva dentro de la mezcla de plasmas que conforman el producto. La especificidad fue 100 %. Conclusiones: Los resultados obtenidos muestran la factibilidad del empleo de los sistemas HBsAg One Versión Ultra, HCV Ab y HIV Ab & Ag (DIAPRO) para el estudio de marcadores virales durante la certificación de productos Hemoderivados.

-Palabras claves: HIV, HbsAg, HCV, Hemoderivado, validación

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-Resumen: The surrogate enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for neutralizing receptor binding domain (RBD) binding to the ACE-2 receptor has been widely used during the Covid-19 pandemic for retrospective contact tracing, investigation of the asymptomatic infection rate, accurate determination of the case fatality rate, and assessment of the humoral protective and herd immunity in recovered patients and recipients of vaccine candidates. The aim of our work was to validate the technique under laboratory working conditions and for this purpose, we used peripheral blood samples from ABDALA-vaccinated individuals with presence of neutralizing antibodies to SARS-CoV2 virus, umbilical cord serum samples from an observational study in ABDALA-vaccinated pregnant women and serum samples from SARS-CoV-2 negative individuals obtained prior to March 2020 (pre-Covid samples). We calculated Accuracy, Specificity and Sensitivity values using the Confusion Matrix. In addition, we performed an Incurred Sample Re-analysis (ISR), correlating the percentage inhibition of RBD binding to ACE2, with the inhibition titer or ID50 (sample dilution where 50% inhibition is observed in the assay). The ISR percentages for inhibition of RBD binding to ACE2 (% inhibition) and for ID50 were above the acceptance range established for that assay (67%). The percentages of Accuracy, Specificity and Sensitivity were higher than 95% in all cases. The validation of this analytical technique is a necessary step to confirm that its use provides reliable and accurate results in the evaluation of samples from individuals vaccinated against Covid-19 and is key to prioritize vaccination strategies, as well as for public health decision making.

-Palabras claves: Validation, ELISA, neutralization, Covid-19, ABDALA

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-Resumen: Context: At the beginning of the pandemic, it was not considered that pregnant women had greater vulnerability than the rest of the population to SARS-CoV-2 infection; in fact, pregnant women had been excluded from clinical trials of the vaccine, as well as of immunization campaigns due to lack of information. Today the criterion for vaccination of pregnant women is very different and it has been proven that pregnant women have an increased risk of having complications and developing severe forms of COVID-19.
General Objective: To evaluate the safety and immunogenicity of the ABDALA vaccine in pregnant women and their newborns.
Methods: It was an observational, descriptive and longitudinal study, with a single cohort, whose results are compared with known data from the general population. It was a multicenter and ambispective study in which information on adverse events during the course of pregnancy was obtained retrospectively and events that occurred during childbirth, the puerperium, and in the newborn were identified prospectively.
Information was obtained from 940 pregnant women vaccinated with ABDALA whose birth occurred between December 2021 and May 2022 in 5 Maternities in the City of Havana. At one of the 5 sites, samples of umbilical cord blood, maternal blood, and colostrum were also obtained for immunogenicity analysis.
Main results: High IgG titers were detected in maternal and umbilical cord blood with high % Inhibition. High titers of IgA and % Inhibition were detected in colostrum. The Ab titers and the % inhibition that are positively correlated in the three compartments in the same way as the maternal Ab and those of the umbilical cord. High IgG placental transfer index is detected: 1.54.
92.6% of the pregnant women vaccinated with Abdala, involved in the study, did not have SARS-Cov-2 infection, of the 6.0 % who had COVID-19, 0.4 % had moderate disease and the rest mild disease. No serious adverse events with a proven causal relationship with the Abdala vaccine were identified.
No events typical of the course of pregnancy, childbirth or the puerperium occurred more frequently than those reported in the stage prior to vaccination or the pandemic. Fetal and neonatal morbidity was not higher than that reported in historical controls.
Conclusions: Vaccination with Abdala during pregnancy, as part of the health intervention during the pandemic, was safe for the mothers and neonates included in this study and provided protection against COVID-19 to the maternal-fetal combination.

-Palabras claves: Inhibition, COVID-19, ABDALA, SARS CoV-2, pregnancy.

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-Resumen: Introducción: En Cuba, el tratamiento de la COVID-19 se resume en el Protocolo Nacional de Actuación con seis versiones y varios elementos clave en su manejo. Los principios de tratamiento se definen por niveles de severidad de la enfermedad por lo que en la medida que se fueron presentando resultados de investigaciones, se fueron conformando las guías de tratamiento. Objetivo: Caracterizar la evolución del Protocolo Nacional de Actuación con sus patrones de atención. Método: Estudio observacional descriptivo donde se utilizó el método de Delphi para definir los elementos principales del diagnóstico y el tratamiento que determinaron la evolución del paciente y los patrones de atención. Se adicionó la tarea de cuantificar el cumplimiento de estos patrones en la práctica médica, una vez determinadas las intervenciones que para cada patrón debían aplicarse según la severidad del cuadro clínico. Resultados: El Protocolo Nacional de Actuación se enmarcó en cuatro etapas. La primera agrupó las cuatro versiones iniciales, la segunda, se caracterizó por el perfeccionamiento de la clasificación de riesgo, contuvo la versión 5; la tercera, con la versión 6, abarcó un enriquecimiento del control epidemiológico, el perfeccionamiento de las indicaciones y el inicio del aislamiento domiciliario de los contactos; y la cuarta etapa se distinguió por la vacunación, se mantuvo la versión 6 con modificaciones para la atención en los servicios, sobre todo en la Atención Primaria de Salud. El uso de antivirales, los anticoagulantes, los antibióticos, el oxígeno, los inmunomoduladores de efecto antinflamatorio y los esteroides, se definieron como las intervenciones terapéuticas claves para la evolución del paciente. Se definieron cuatro patrones de atención: leve (Patrón 1), moderado (Patrones 2 y 3, uno sin signos de enfermedad inflamatoria sistémica y otro con signos) y severo (Patrón 4). Los interferones fueron usados de forma adecuada en más del 80% de los casos que lo requerían, pero en casi el 30% de los que no lo llevaban. Los anticoagulantes se usaron adelantados desde la etapa leve en más del 40% de los casos y los antibióticos fueron los medicamentos más usados. Los inmunomoduladores de efecto antinflamatorio se usaron menos que lo esperado. Los esteroides se usaron en más del 80% de los casos graves. El uso de la oxigenoterapia inició en el paciente moderado, como se había propuesto. Conclusiones: El Protocolo Nacional de Actuación se consolidó en cada etapa y dio lugar al establecimiento de patrones de tratamiento para cada nivel de severidad. Las intervenciones definidas para cada patrón, se aplicaron de forma general como se concibieron, pero hubo desviaciones que abren nuevas posibilidades de investigación a los resultados de su aplicación.

-Palabras claves: protocolo de actuación; intervenciones clínicas; patrones de atención médica; COVID-19.

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-Resumen: Contexto: Durante la pandemia de COVID-19, el CIGB trabajó en el desarrollo de varios candidatos vacunales empleando plataformas conocidas por esta institución, siendo uno de estos la vacuna Abdala. Una vez demostrada la seguridad e inmunogenicidad de Abdala en ensayos preclínicos y toxicológicos, se aprobó su evaluación en humanos, ejecutándose estudios clínicos y de intervención poblacional, que permitieron obtener primero el Autorizo de Uso de Emergencia y posteriormente el Registro Sanitario. Abdala es una vacuna con una eficacia del 92,28 % para la prevención de COVID-19 y 100% de eficacia en la prevención de la enfermedad severa y la muerte. Desde los inicios y hasta la fecha han sido aplicadas más de 20 millones de dosis como parte del esquema completo y más de 12 millones de dosis de refuerzo, para un total de 32 856 013 dosis aplicadas. La estrategia de vacunación ha incluido adolescentes de grados terminales, niños mayores de dos años de edad, embarazadas y mujeres que lactan. entre otros grupos. Objetivos: Caracterizar el perfil de seguridad de la vacuna Abdala en Cuba en el periodo 2022-2023. Metodología: A través de la Dirección Nacional de Estadística del Ministerio de Salud Pública se obtuvo la información sobre las dosis aplicadas en el periodo. Los eventos adversos fueron recibidos mediante notificaciones espontáneas directas al CIGB y de la Base de datos del Sistema de Vigilancia de Eventos Adversos del Programa Nacional de Inmunizaciones. Resultados: En el periodo se aplicaron un total de 5, 999,200‬ dosis, equivalentes 1, 199,840 vacunados, de los cuales 331 presentaron eventos adversos, para una tasa de 5.5 x 105 dosis aplicadas. Fueron reportados 656 eventos reportados (1,9 eventos por pacientes); se afectaron 8 Sistemas de Órganos/Clases, con 36 tipos diferentes de eventos adversos. Predominaron el dolor, enrojecimiento e inflamación (DEI), la fiebre ˃ 38º C, la cefalea y la somnolencia; lo cual no difiere de lo observado durante los ensayos clínicos y estudios de intervención. El 99 % de los eventos fueron clasificados como no graves y un 0.9% como grave. No se reportaron eventos mortales en el periodo. Conclusiones: Los resultados de la administración de la vacuna Abdala han demostrado que el producto es seguro, manteniendo un perfil beneficio/riesgo favorable.

-Palabras claves: Abdala, vacunas Covid 19, Eventos Adversos

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-Resumen: There are many infectious diseases for which vaccines are still not available or the available vaccines are suboptimal. This can be explained by different factors, which render difficult either vaccine development or the successful implemention of vaccination campaigns. Among them, there are two major bottlenecks affecting vaccine design and their effective deployment, which will be addressed.
The first bottleneck is that we are not all equally responsive to vaccination. There are indeed physiological and pathological conditions affecting vaccination responses in different subpopulation groups. System vaccinology-driven approaches supported by in depth immune profiling and multi-Omics can be exploited to dissect the molecular pathways and vaccination networks in poor and good responders. A case study on responsiveness to influenza vaccination in the elderly will be presented, which provides leads towards tailored vaccination strategies and predictive diagnostics.
The second bottleneck was associated with the advent of subunit vaccines. This approach making use of highly purified antigens rendered critical to improve the strength, quality, breadth and duration of vaccine responses. To this end, the use of adjuvants became a standard practice. However, only few last generation adjuvants with well-defined molecular targets and mode of action are available. In particularly adjuvants able to promote not only humoral but also cellular responses, at both mucosal and systemic level. This indeed can confer protection not only against disease but also against infection, thereby blocking horizontal transmission to susceptible contacts. Our adjuvant discovery program led to the development of several immune modulators with well-defined molecular targets, which are also active when administered by the mucosal route. One promising compound class comprises the cyclic-di-nucleotides (CDNs), which are signaling molecules with strong immune modulatory effects on antigen presenting cells by activation of a STING-TBK1-IRF3 signaling cascade leading to the upregulation of type I interferon and TNF expression. Co-administration of CDNs with purified antigens triggers strong humoral and cellular immune responses with a balanced Th1/Th2/Th17 phenotype and induces multi-functional and cytotoxic cells. The CDNs can be combined with other antigen delivery technology platforms, such as nanoparticles, and demonstrated activity in models of poor response to vaccination. Case studies of vaccine candidates adjuvanted with c-di-AMP against viral and parasitic diseases will be presented, which demonstrate that this new generation of synthetic adjuvants represents a powerful tool for optimizing the rational design of next generation vaccines.

-Palabras claves: CDNs,CDA,vaccine, adjuvant

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-Resumen: Context: An aging population creates severe problems worldwide, such as the increasing prevalence of age-related diseases and disabilities, including cognitive and functional decline. The large variability of symptoms among individuals of the same age, makes it imperative to find early biomarkers that can help identify individuals at risk of developing accelerated pathological. Significantly, gait alterations are associated with cognitive decline, risk of falls, disability, and death in older adults. Gait speed is used in clinical practice as the main predictor of adverse outcomes. Recent studies have proposed to search for these biomarkers from electroencephalography (EEG), as it is a portable, noninvasive and cost-effective tool that reflects the macroscopic brain activity with a high temporal resolution. They suggest that resting-state EEG patterns are promising for assessing age-related functional decline and for screening elderly individuals at risk of neurological disease.
Objectives: We seek stable Electrophysiological Source Imaging (ESI) biomarkers associated with Gait Speed (GS) as a measure of functional decline. To this end, we determine the predictive value of ESI activation and connectivity patterns of resting-state EEG Theta rhythm on the physical performance decline measured by a slowing GS in aging individuals.
Materials and methods: We propose a novel mathematical methodology that combines feature selection from ESI with a Stable Sparse Classifier procedure to examine the ability of source (activity/connectivity) spatial patterns of resting-state theta rhythm to predict a decline in physical performance of aging persons, as reflected in gait speed slowing.
This two-step methodology consists in selecting those brain regions whose resting-state theta rhythm sources show activity or connectivity spatial patterns that stably predict a physical performance decline in aging individuals, as reflected by a Gait Speed slowing. The first step involves the estimation of ESI using a new sparse penalized model, from which activation ESI (aESI) and connectivity ESI (cESI) features are derived. The second step then feeds those features into the Stable Sparse Classifier method to select stable potential biomarkers related to GS changes. We analyzed the data of 66 elder women from a longitudinal study of aging conducted in Havana, from 2010 to 2016.
Main results and, Conclusions: Predictive models using aESI from our sparse solution outperformed those obtained from traditional methods such as LORETA. The models using a combination of both aESI and cESI features averaged in brain regions of interest, called acESI, provided the best prediction of GS changes. The proposed methodology contributes to the understanding of activity and connectivity ESI related to GS changes and provides features that are potential biomarkers of GS decline. Given the known relationship between gait decline and cognitive impairment, this opens novel paths to study the progression of healthy and pathological aging.

-Palabras claves: Electrophysiological source imaging, multiple penalized-least-squares, Stable Sparse Classifiers, gait speed, healthy aging.

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Contexto: En la actualidad, la disponibilidad de biomarcadores útiles para diagnosticar y llevar a cabo estrategias terapéuticas más efectivas y personalizadas en las enfermedades mentales son aún insuficientes. En este sentido, existe el consenso de desarrollar diseños transdiagnósticos que identifiquen alteraciones neurobiológicas comunes a varias entidades psiquiátricas o que constituyan marcadores diferenciales. En este trabajo se aborda la disfunción en la regulación emocional que constituye una característica común en muchas de las enfermedades psiquiátricas y el impacto de la Revaluación Cognitiva (RC) como terapia para el fallo en la regulación emocional en los Trastornos Depresivos (TD) y el Estrés Postraumático (EPT)

Objetivos: Los objetivos del presente trabajo fueron: a) identificar, en pacientes con Trastornos depresivos (TD) y Estrés Postraumáticos (ETP), los correlatos neurales relacionados con las alteraciones del reconocimiento emocional que sean comunes o diferentes entre ambas enfermedades y b) caracterizar el impacto de la autorregulación del área ventrolateral de la corteza prefrontal (vlCPF) mediante Neurofeedback basado en la Resonancia Magnética Nuclear en tiempo real (NF_RMNf).
Materiales y Métodos: Se estudiaron 96 participantes (39 pacientes con TD, 20 pacientes con EPT y 37 controles sanos) mediante imágenes de RMNf y pruebas neuropsicológicas. Se examinó el circuito neuronal de la regulación de las emociones en estas poblaciones clínicas mediante análisis de conectividad funcional.
Resultados: Estos estudios revelaron que los pacientes TD y ETP tenían un patrón común de menor activación en el giro frontal inferior (GFI) cuando realizaban la RC ante estímulos negativos en comparación con los controles y que la actividad del GFI derecho se correlacionó negativamente con la gravedad de la sintomatología ansiosa y depresiva. Sin embargo, ambas entidades tuvieron patrones diferenciales de conectividad funcional. En el segundo estudio se observó que la autorregulación de la vlCPF como parte del GFI es capaz de reducir los síntomas depresivos. La autorregulación de la vlCPF izquierda logró los mayores niveles de activación, correlacionó positivamente con escalas clínicas de regulación emocional. Adicionalmente, a las 4 semanas de finalizado el tratamiento con NF_RMNf, el 75 % de los pacientes demostraron mayor tendencia a realizar la RC y el 55 % mantuvieron una reducción de los síntomas clínicos lo que apoya la utilidad clínica del NF_RMNf. En conclusiones, el déficit en la actividad de la región vlCPF como parte del GFI juega un papel importante en los mecanismos causales de las alteraciones de la regulación de la respuesta emocional y es un elemento común en los trastornos afectivos y de ansiedad.
Discusión: La NF_RMNf es una estrategia eficaz para la autorregulación de la vlCPF por lo que constituye una diana terapéutica para el manejo de los trastornos de ansiedad y depresión. Ambos resultados abren un camino a modelos terapéuticos más eficientes y personalizados, con reducción en el uso de psicofármacos y que brinden una mayor calidad de vida a los pacientes con trastornos mentales.

-Palabras claves: Depresión; Trastorno por Estrés Postraumático; Resonancia Magnética funcional; Neurofeedback; Revaluación Cognitiva

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: Background: Severely maltreatment child is a harmful social factor that can disrupt normal neurodevelopment. Two commonly reported effects of maltreatment are post-traumatic stress disorder (PTSD) symptoms and brain structural and functional alteration. While Trauma-Focused Cognitive-Behavioral Therapy (TF-CBT) is effectively used to reduce PTSD symptoms in maltreated children, yet, its impact on brain structural alterations has not been fully explored. This study investigated whether TF-CBT can attenuate alterations in brain structures associated with PTSD in middle childhood. Methods: The study evaluated the longitudinal effects of Trauma-Focused Cognitive-Behavioral Therapy (TF-CBT) on post-traumatic stress disorder (PTSD) symptoms and gray matter volume (GMV) in two groups of children under 12 years old: maltreated children (MC) and healthy non– maltreatmentd children (HC). Structural magnetic resonance images T1 were obtained before and after TF-CBT in the MC group, while the HC group was scanned twice within the same time interval. Voxel-based morphometry (VBM) was used to analyze GMV changes over time. Results: After TF-CBT, maltreated children showed significantly reduced PTSD symptoms. Furthermore, a significant group-by-time interaction effect was observed in certain areas of the Left Temporal, Left Occipital, and bilateral Frontal Cortex, the Basal Ganglia and Cerebellum. These interaction effects were driven by a GMV decrease in the MC group compared to the HC group. GMV changes can be predicted with clinical improvement in the left Middle Temporal gyrus, left Precuneus, and Cerebellum. Conclusions: Our results suggest that TF-CBT intervention in very young maltreated children may have an effect on gray matter. This evidence demonstrates the importance of timely intervention when neuroplasticity mechanisms may be activated.

-Palabras claves: Cognitive-Behavioral Therapy, gray matter volume (GMV), post-traumatic stress disorder (PTSD), Voxel-based morphometry (VBM).

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: Contexto: La Enfermedad de Alzheimer (EA) es una entidad compleja, de naturaleza neurodegenerativa y representa la forma más común de demencia.
Objetivo. Describir las características sociodemográficas y clínicas de pacientes con EA en la provincia de Villa Clara, Cuba.
Materiales y métodos. Estudio observacional, descriptivo de corte transversal, en 100 pacientes evaluados en la Consulta Provincial de Deterioro Cognitivo del Hospital Arnaldo Milián Castro de Villa Clara con diagnóstico de EA fenotipo amnésica según los criterios establecidos por NIA-AA en el año 2018. Se estudiaron variables sociodemográficas (edad actual; sexo biológico; nivel educacional; profesión; procedencia; municipio de residencia; color de piel; per cápita familiar) y variables clínicas (estadío de la enfermedad clasificado a través de CDR; antecedentes de familiares de demencia; antecedentes patológicos personales; edad de inicio de los síntomas; tiempo de evolución; estadío clínico; estado mental o cognitivo (ADAS-Cog); estado funcional (Índice de Katz) y estado afectivo (Escala de Cornell). Se realizó el análisis estadístico descriptivo para cada variable, en una distribución de frecuencias, media y DS. Para determinar si los datos de la muestra eran representativos de la población se aplicó la prueba de bondad de ajuste (Chi-Cuadrado de Pearson: X2), y se consideró estadísticamente significativo la probabilidad de ocurrencia ≤ 0,05.
Resultados. el 62,0% de los pacientes eran féminas (X2=5,760; p=0,016), y el 74,0% tenían edades superiores a los 70 años (X2=33,280; p=0,000); siendo la edad media ± S del debut de la enfermedad 71,65±8,027 años. Prevalecieron los sujetos de piel blanca (84,0%) y procedentes de zonas urbanas (73,0%) en especial los pertenecientes al municipio Santa Clara (67,0%). La distribución de los pacientes según nivel de escolaridad no difirió significativamente (X2=6,200 p=0,185), no obstante predominaron las amas de casa (16,0%) y la profesión económico-contador (10,0%). El 49,0% de la muestra presentaba antecedentes familiares de demencia. El antecedente personal más frecuentemente reportado fue HTA (59,0%), seguido de COVID-19 (27,0%). La evaluación cognitiva mostró que el 62,0% de los pacientes se encontraban en la categoría de “Estadío Leve” (ADAS-Cog: 24,10±6,206), la valoración funcional y afectiva demostraron que el 66,0% de los pacientes eran independientes para la realización de actividades básicas de la vida diaria, y solamente el 16,0% presentaban depresión menor (Escala de Cornell: 1,38 ± 0,488), respectivamente.
Conclusiones. La EA prevaleció en mujeres, de piel blanca y en quienes superaban la séptima década de vida. La mayor parte de los pacientes eran amas de casa y procedían de zonas urbanas en especial al municipio Santa Clara. Predominaron los pacientes hipertensos, en estadío leve de la enfermedad con desempeño independiente para la resolución de actividades básicas de la vida diaria.

-Palabras claves: Demencia, Enfermedad de Alzheimer, Neurodegenerativa, Características sociodemográficas, Evaluación Cognitiva.

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-Modalidad: Póster

-Resumen: The cerebellum has conventionally been viewed as the primary brain structure responsible for coordinating motor functions. However, a substantial body of clinical, imaging, and electrophysiological evidence has accumulated over over three decades, substantiating the cerebellum's involvement in non-motor functions, including cognition, emotions, and sleep. Despite this growing understanding, the precise mechanisms through which the cerebellum influences these non-motor functions remain elusive.

Studying patients afflicted with cerebellar disease offers valuable clinical insights into these non-motor functionalities. In the context of our presentation, we showcased key findings concerning the characterization of cognitive impairment biomarkers in individuals with Spinocerebellar Ataxia type 2 (SCA2) using clinical and electrophysiological methodologies.

Our analysis unveiled associations between clinically-assessed cognitive deficits and ataxia severity, underscoring a correlation between the severity of cerebellar motor impairments and cognitive dysfunction in SCA2. To explore the concept of "dysmetria of thought," we employed two video game-based paradigms to evaluate the brain's physics engine – recently reported – in 40 SCA2 patients and matched controls. Our study demonstrated a higher incidence of failed predictions in SCA2 patients, indicating a diminished capacity for physical intuition in these individuals, likely attributable to cerebellar involvement in the brain's physics engine.

Furthermore, our research delved into the relationship between sleep microstructure abnormalities and cognition in 40 SCA2 subjects and examined how cerebellar atrophy influences these features. We observed a significant correlation between sleep spindle activity and performance in verbal memory tests and associations between cerebellar volumes and sleep spindle activity, reaffirming the cerebellum's role in generating these EEG features. These findings underscore SCA2 as a valuable model for elucidating the cerebellum's contributions to sleep and cognition

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: Psychologists have long dealt with the concept of cognitive reserve, as a capacity of the mind (and consequently of the brain) to resist challenges imposed by the environment, such as neurodegenerative diseases, congenital malformations, traumas etc. What in the brain would underpin this concept? My group has tried to assess the hypothesis that the number of brain cells would be an answer, with positive and negative results. However, more recently, we could open a new window with the discovery that long-distance plasticity of brain connections is largely made possible by the existence of previously unnoticed connections in the brain. Presumably, these “secret” connections allow the brain connectivity to expand in some “emergence” conditions, and thus either compensate or aggravate the final pattern of brain structure and function.

-Palabras claves: Connectomic , Brain, conectomic reserve

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: La demencia se define como un síndrome caracterizado por la presencia de deterioro cognitivo, trastornos conductuales y un impacto relevante en la funcionalidad o capacidad de llevar a cabo las actividades diarias, es causada por una enfermedad que afecta al sistema nervioso central. En las fases iniciales se destaca el deterioro de la memoria, asociado a la aparición progresiva de un deterioro del pensamiento abstracto, de la capacidad de razonamiento y de otras funciones corticales superiores, así como importantes cambios de la personalidad.
Algunos tipos de demencia pueden aparecer antes de los 60 años, aunque la gran mayoría se presentan después de esta edad y se duplica por cada década de la vida, por lo que incrementa su frecuencia de manera acelerada y tiene un alto impacto individual, familiar y social. Existen varios tipos de enfermedades neurodegenerativas de la demencia como Alzheimer (EA), demencia con cuerpos de Lewy (LBD), demencia vascular entre otras. En la actualidad se reconoce la implicación que tiene este problema de salud, no solo para el paciente sino para el cuidador.
En la medida en la que el cuidador percibe que el cuidado ha tenido un efecto adverso en su funcionamiento físico, emocional y socioeconómico. Se presentan numerosos efectos psicológicos en ellos, los cuales repercuten perjudicialmente sobre su salud general, aumenta la tensión de los miembros de la familia, y se hace más difícil la tarea del cuidado para quienes asumen esta responsabilidad dentro de ella.
El objetivo de esta ponencia es profundizar en las enfermedades neurodegenerativas como la demencia, conocer las consecuencias que produce en el paciente. Asimismo abordar los efectos negativos que provocan para el cuidador. Los métodos que se utilizaron fueron el histórico y lógico y la sistematización.
Como resultado se sistematizaron los criterios de diferentes autores, a partir de sus publicaciones científicas, se analizaron fuentes bibliográficas las que revelaron que la mayoría de los cuidadores han sido mujeres (45, 90%) y en un 54% le corresponde a adultos mayores de 60 años. Una parte de los pacientes con demencia severa están a cargo de un cuidador con sobrecarga intensa, por lo que existe una relación entre el grado de deterioro clínico de la demencia y la sobrecarga intensa del cuidador (probabilidad de 0.8%) lo que a su vez evidencia que a medida que la demencia del paciente empeora, los cuidadores experimentarán niveles más altos de sobrecarga.
Los encargados de atender a los pacientes con esta condición muestran: abandono de sí mismo, pérdida de roles y el temor al futuro. El bienestar de los pacientes con enfermedades neurodegenerativas y sus cuidadores, están estrechamente relacionados, ambos necesitan mucho apoyo y atención. Debido a ello se puede contribuir significativamente a mejorar la calidad del cuidado brindado y promover una mejor calidad de vida para todas las personas involucradas en este proceso.

-Palabras claves: cuidadores
demencia
deterioro cognitivo
enfermedades neurodegenerativas

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Understanding how functional networks emerge from the structural organization of the brain is essential for studying its structure-function relationship. Specifically, the autonomic Default Mode Network (DMN) is a resting-state sub-network that is active in almost all physiological brain states (i.e., is central to cognition), and arises from the functional dynamics of the brain's anatomical/structural connectome (SC).
Here, we first validate an Ising model with two neural message-passing algorithms, Belief-Propagation (BP) and Susceptibility-Propagation (SP), to describe the macroscopic resting-state functional activity and connectivity of the brain, respectively, using a large human dataset of healthy individual SCs (n=70). We also use a small dataset of schizophrenia disease (healthy controls 27, patients 27) to explore possible clinical applications of this methodology. In each subject both algorithms were applied on the individual SC using an atlas of eight resting-state sub-networks.
In the validation sample, group ROC sub-network analysis over the electrical activation maps obtained with BP showed that the DMN had the highest mean AUC (.98) and was the only one significantly different to all others sub-networks in post-hoc tests. Furthermore, the long-range correlation matrices estimated by SP could predict the sub-networks labels using the connectivity pattern of each region as features. Moreover, the DMN was also the best predicted.
These results were replicated in the schizophrenia dataset. However, there was a significant difference in the critical temperature estimated of the dynamic system between patients and controls. Based on the traditional view of schizophrenia as a neurodevelopmental disorder, this result suggests that these patients undergo some functional brain reconfiguration to show the typical DMN. Interestingly, this result could also be useful to explore the progression of the disease and the plausibility of the neurodegenerative hypothesis on schizophrenia.
This study confirmed that the DMN emerge from the dynamics on the individual SC (using BP) and all resting-state sub-networks can be learned from long-range correlations (using SP). These results are promising to further investigate the physiological role of the DMN and the structure-function relationship of the brain not only at rest but also during cognitive processes. This validation is also crucial for a deeper understanding of neural connectivity changes in pathological data such as schizophrenia, and other age-related and neurodegenerative processes. Finally, the neural message-passing methodology might also allow to infer causal relationships between anatomical and functional brain connectivity.

-Palabras claves: neural message passing
Default Mode Network
human connectome
schizophrenia
criticality

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: Los estudios de Neurotoxicidad son de suma importancia para la evaluacion de los neuroprotectores. Se estableció la metodología con sistema de procedimientos para cumplir la regulacion que establece este tipo de ensayo. Se empleo el estudio crónico de la NeuroEPO se incluyó esta evaluacion, según se recomienda internacionalmente. Se realizaron evaluaciones a 6 animales de ambos sexos de los grupos control y dosis Alta antes de comenzar el estudio, a los 3 meses, al finalizar el período de administración (6 meses), y al concluir el período de recuperación. Se realizó la evaluación neurológica, los reflejos, los sentidos. Se realizó además la evaluación de la fuerza motriz, coordinación motora, equilibrio, habituación, socialización, la ansiedad, el comportamiento, memoria y aprendizaje, se emplearon pruebas afines a cada evaluacion. Se presentaron hallazgos significativos en la evaluación neurológica los animales Tratados a los 3 y 6 meses, muestran disminucion significativa de la actividad exploratoria, por lo que pudiera tener la NeuroEPO un ligero efecto sedante. La evaluación sensorial y de los reflejos no tuvieron cambios significativos. Se mantuvo sin afectación significativa durante los 6 meses la coordinación motora, incluso las hembras tratadas con NeuroEPO muestran mejor comportamiento que las controles. La fuerza motriz y el equilibrio en los animales Tratados con NeuroEPO no tuvieron afectación. El comportamiento, la memoria y el aprendizaje no tuvieron afectación en los 6 meses de aplicación del tratamiento, las hembras tratadas con NeuroEPO intranasal muestran mejor comportamiento en estas evaluaciones. Se observó una disminución significativa de los niveles de MDA en las hembras en todos los órganos evaluados en especial en el riñón, lo que puede indicar la inhibición de la peroxidación lipídica, y en el caso de los machos existe un aumento de la actividad de la catalasa ambos indicadores pueden ser demostración del efecto antioxidante de la NeuroEPO. No se presentaron diferencias significativas en la morfometría realizada al tejido cerebral de los animales Tratados 6 meses con NeuroEPO comparado con los Controles. No existen signos o síntomas de Neurotoxicidad de la NeuroEPO en ninguno de los tiempos evaluados.

-Palabras claves: Neurotoxicidad, NeuroEPO, neuroprotector

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-Modalidad: Póster

-Resumen: La enfermedad de Alzheimer es la forma más común de demencia, y se estima un ascenso de pacientes con este padecimiento para los próximos años, por lo tanto es necesario el desarrollo nuevos medicamentos, con el fin de retrasar la evolución y el declive de dicha enfermedad. BioCen-128 gotas nasales es una formulación en desarrollo para el tratamiento de la demencia, contiene como Ingrediente Farmacéutico Activo (IFA) una mezcla de proteínas y péptidos extraídas del timo bovino, las cuales se ha demostrado mediante estudios preclínicos que poseen un efecto neuroprotector. Este trabajo tuvo como objetivo evaluar la estabilidad en vida de estante de una formulación de BioCen-128 en gotas nasales y predecir su estabilidad.
En el estudio se evaluó la estabilidad de tres lotes producidos en la Planta de Productos Parenterales de BioCen bajo Buenas Prácticas de Fabricación. Cada uno de los lotes estaba compuesto por la mezcla de proteínas y péptidos, un estabilizante de proteínas, preservos, un codisolvente, un agente viscosante y solución de suero fisiológico. Una vez demostrado que los lotes cumplieron con los requisitos de calidad que se incluyeron en el proyecto de especificación, se inició un estudio de estabilidad, las muestras fueron almacenadas a la temperatura de vida de estante de 2 a 8°C. En los diferentes tiempos experimentales se analizaron los parámetros físico-químicos pH, características organolépticas y proteínas totales. Además, en el tiempo inicial se realizó la cuantificación de preservo, el límite microbiano y la presencia de patógenos. Con los resultados obtenidos hasta los 3 meses se realizó el análisis de regresión en el programa estadístico Minitab.
Como resultado del estudio se obtuvo que durante los primeros tres meses los tres lotes cumplieron con todos los requisitos de calidad. En cuanto a la concentración de proteínas totales, en los lotes se observó una disminución de la concentración. Los valores de esta variable fueron utilizados para realizar el análisis de regresión considerando como límite inferior de especificación 1,4 mg/mL y se predijo un período de estabilidad de las formulaciones de 5 meses. Suponemos que este resultado está relacionado con el efecto del preservo ya que existen reportes de la literatura de que en algunas formulaciones con proteínas pueden provocar inestabilidad.
La formulación de Biocen-128 es estable hasta 3 meses y esta estabilidad puede extenderse hasta 5 meses según la estimación realizada por la herramienta estadística. Para próximos estudios se recomienda evaluar otras variantes de formulaciones de Biocen-128 en gotas nasales con el fin de mejorar la estabilidad de las proteínas.

-Palabras claves: BioCen-128, gotas nasales, proteínas y péptidos, demencia.

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Context: Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disorder leading to dementia, the main manifestation of which is progressive memory loss. Although its etiology remains unclear, several hypotheses have been proposed to explain the progression of this disease. Of these, the most studied is the cholinergic transmission dysfunction hypothesis, which explains the slowing of AD progression. Donepezil is the most widely used drug for this purpose. It is a selective and reversible inhibitor of the enzyme acetylcholinesterase (AChE) and exerts symptomatic effects in the treatment of AD. Various donepezil derivatives have been screened using computational techniques in search of more potent compounds. Objectives: In this work, 27 new compounds derived from naphthylamine, belonging to the Amylovis family of compounds, were evaluated in silico Materials and methods using quantitative structure-activity relationship (QSAR), docking and molecular dynamics techniques as potential AChE inhibitors. Main results: The QSAR model obtained allowed elucidating the molecular properties of the inhibitory activity, through a correlation between the inhibitory activity and several molecular descriptors, such as: the octanol-water partition coefficient (log P), the partial charge on carbon atom 1 (q1) of the aromatic structure, the enthalpy variation associated with the process (ΔH) and the number of hydrogen bond acceptor elements (naccr). In addition, Amylovis-AChE complexes were obtained by molecular docking to elucidate the nature of the interaction. Molecular dynamics simulations evaluated the temporal stability of the complexes and showed that the amino acids Ser200, His440, Phe330, Trp84 and Trp279 were the most important in the interaction. Both computational methods facilitated the identification of promising Amylovis compounds as potential drug candidates for the treatment of AD. Conclusions: In sum, the in silico approach presented here represents the comprehensive analysis performed on a set of new compounds with potential application in the treatment of AD, which may be significant in the design of drugs against this disease.

-Palabras claves: Alzheimer's disease, acetylcholinesterase enzyme, QSAR, docking and molecular dynamics

-Autores:

-Modalidad: Ponencia

-Resumen: Contexto: La apolipoproteína E (ApoE) es una proteína de 299 aminoácidos, esencial en la regulación del metabolismo de los lípidos, que actúa como ligando para los receptores hepáticos e interviene en la homeostasis de la glucosa y el colesterol. Dos polimorfismos en el gen APOE dan lugar a tres alelos (ε2, ε3 y ε4) que originan seis genotipos con diferente funcionalidad. La genotipificación permite identificar a los individuos más predispuestos a la enfermedad de Alzheimer de inicio tardío, además de que sirve para orientar el diagnóstico, evaluar el riesgo, prevenir y tratar patologías como la enfermedad de Parkinson, la demencia vascular, el cáncer de próstata, entre otras. Objetivos: Por la importancia de esta genotipificación y dada la ausencia de un estuche nacional para realizarla se condujo esta investigación que permitió desarrollar y evaluar un nuevo ensayo que detecta las variantes alélicas del gen APOE. Materiales y métodos: El método comienza con la extracción de ADN genómico de sangre seca sobre papel de filtro mediante la resina quelante Chelex-100. Se diseñaron cebadores específicos para los alelos y para regiones conservadas del gen APOE útiles como controles internos de cada amplificación. Se estandarizaron las mezclas de reacción Ɛ2, Ɛ3 y Ɛ4 para la caracterización alélica de cada muestra. Se realizó PCR en tiempo real múltiple y análisis de fusión de alta resolución (HRMA) para la distinción del alelo y el control interno. Se evaluaron los parámetros: concordancia, sensibilidad, reproducibilidad y especificidad clínica y analítica del ensayo. Resultados principales: Se obtuvo una concordancia del 100 % con un estuche comercial, coeficientes de variación intra e interensayo inferiores al 0,46 % y una detección de hasta 5 ng/µL de ADN de las muestras por mezcla. Conclusiones: El ensayo demostró ser específico en el reconocimiento de las secuencias de interés y constituye una forma sencilla y económica de determinar el genotipo de cada individuo.

-Palabras claves: APOE; Enfermedad de Alzheimer tardía; HRMA; Genotipificación

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Background: The EEG constitutes a powerful neuroimaging technique for assessing functional brain impairment in COVID-19 patients.
Objective:The current investigation compared the EEG among COVID-19 survivors, close contacts and the Cuban EEG normative database, using semi-quantitative visual EEG inspection, quantitative and the current source density measures EEG analysis. Methods: The resting-state EEG activity, quantitative QEEG, and VARETA inverse solution, were evaluated in 173subjects: 87 patients confirmed cases by the positive reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), 86close contacts (negative PCR) and the Cuban EEG normative database. All patients were physical, neurological, and clinically assessed using neurological retrospective survey and version 2.1 of the Schedules for Clinical Assessment in Neuropsychiatry (SCAN).
Results: The GTE score showed significant differences in terms of frequency scores of backgrounds rhythmic activity, diffuse slow activity, and focal abnormality. The QEEG analysis showed a pattern of abnormality with respect to the Cuban EEG normative values, displaying an excess of alpha and beta activities in the fronto-central-parietal areas in both groups. The anomalies, of COVID-19 patients and close contacts, differs in the right fronto-centro parietal.. The COVID 19 group differed-s from the close control group in theta band of the right parieto-central. The symptomatic group of COVID-19 patients differs from asymptomatic patients in delta and theta activities of the parieto-central region. The sources of activation using VARETA showed a difference in cortical activation patterns at alpha and beta frequencies in the groups studied with respect to the normative EEG database. In beta frequency were localized in right middle temporal gyrus in both groups and right angular gyrus in Covid 19 group only. In alpha band, the regions were the left supramarginal gyrus for Covid 19 group and the left superior temporal gyrus for Control group. Greater activation was found in the right middle temporal gyrus at alpha frequency in COVID-19 patients than in close contacts of COVID-19 patients. Conclusions: Brain functions are impaired in long COVID-19 patients. QEEG and VARETA permit us to comprehend the susceptibility of particular brain regions exposed to viral illness.

-Palabras claves: EEG, QEEG, VARETA, Covid-19

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-Modalidad: Ponencia

-Resumen: Attention and executive function problems are very frequent in school-age children. Current studies shows that deficits in this skills are associated with low academic achievement and several neurodevelopmental disorders. Pharmacological treatments are the most frequently used evidence-based intervention to address these problems. However, some patients do not respond to these treatments or have side effects and treatment costs are very high for families or health care systems. In this scenario, digital interventions emerge as a valuable alternative for cognitive rehabilitation. Some clinical trials have reported positive effects of videogames training on executive functions in children with attention problems but there is still a debate about the reliability of these results due to methodological problems such as inadequate control of the experimental conditions, the use of small and heterogeneous samples and the use of output measures similar to training tasks. Here our goal is to evaluate the efficacy of two videogames from the Optima Stimulation Suite to improve attention in children with deficits in this process. We also aim to assess the impact of this training on reading and arithmetic performance. 48 children from mainstream education (aged 7-12 years) with normal intelligence and attention deficits with or without a diagnosis of ADHD were included in the study. Participants were assessed before and after the intervention with a Continuous Performance Test, the Text Segmentation Test and the Arithmetic Fluency Test. They were randomly assigned to an experimental or a control group. The experimental group played on a tablet two videogames from the Optima Stimulation Suite during 30 minutes across 30 training sessions. The control group played two commercial educational games for the same amount of time. The intervention was carried out at school, in an isolated room. Mixed effects models were used to analyze the change in performance from pretest to posttest. The analysis revealed a significant interaction effect of Group x Time on the number correct responses in the complex part of the continuous performance test which means an increase in the number of correct responses in the experimental group compared to the control group. No other measure improved with the training. This intervention could be used in real educational settings to reduce the inattention of schoolchildren but there was no evidence of a transfer effect to academic performance in the domain of reading and arithmetic. Further research is needed to address this problem and its inclusion in more general intervention plans.

-Palabras claves: attention, videogame training, executive functioning, ADHD, Optima Stimulation

-Autores:

-Modalidad: Póster

-Resumen: Introduction: Stroke, a global unmet clinical need, is particularly prevalent in Cuba due to the aging population. In our quest for effective acute stroke treatments, we have explored a combined therapy of Growth Hormone Releasing Peptide-6 (GHRP6) and Epidermal Growth Factor (EGF). This combination targets multiple elements of stroke’s complex pathophysiology, offering cytoprotection in the ischemic penumbra area. The EGF+GHRP6 therapy impacts not only neurons but also glial cells and vascular endothelium, eliciting endogenous neuroprotective mechanisms while addressing other injury phenomena such as oxidative stress, mitochondrial dysfunction, and glutamate-induced excitotoxicity.
Methods: This presentation covers the milestones of our research project, which assessed the therapeutic effects of EGF+GHRP6 in animal models of cerebrovascular diseases and in clinical trials.
Results: Our preclinical assessments showed that the combined EGF and GHRP6 therapy improved neurological grade, survival, and reduced infarct volume while preserving neuronal density in models of global and focal brain ischemia. Proteomic analysis and functional categorization revealed that proteins modified by EGF and GHRP6 are involved in key biological processes such as energetic resilience, inflammation, biogenesis, and neuroregeneration. In phase I/II and phase III clinical trials with acute stroke patients, the combined EGF and GHRP-6 therapy demonstrated a high safety profile, significant reduction of the modified Rankin scale (mRS) at 3 and 6 months post-stroke, and increased survival.
Conclusions: Our preclinical research findings have been successfully translated to the clinical setting. The clinical trials have demonstrated that the combined therapy of EGF and GHRP-6 is not only safe but also notably enhances survival rates and diminishes disability among the patients. The rationale for the combined therapy lies in its multifaceted neuroprotective approach. It not only aims to prolong penumbral survival but also leverages the synergistic and unique effects of EGF and GHRP6. This convergence amplifies both the neuroprotective and regenerative attributes, leading to enhanced recovery.

-Palabras claves: combined therapy, stroke, effect size, MCID, EGF, GHRP6

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-Modalidad: Conferencia

-Resumen: Contexto: El Desarrollo Psicomotor (DPM) es un indicador directo y positivo de salud cuya vigilancia es importante para la supervisión del bienestar infantil.
Objetivo: Comparar las características del DPM de niños cubanos con los otras poblaciones internacionales.
Materiales y métodos: Se realizó un estudio transversal en La Habana (enero de 2015 - diciembre 2019). Se estimaron los percentiles 25, 50, 75 y 90 de la edad de cumplimiento de pautas de DPM en 1333 niños sanos, menores de seis años. Se comparó el valor de la Tendencia del Desarrollo Psicomotor (TDP) e Índice de Desarrollo Psicomotor (IDP) de la muestra con referencias internacionales. Los datos fueron analizados con el paquete estadístico SPSS y el programa R.
Resultados: Las edades de cumplimiento de pautas de DPM obtenidas constituyen indicadores directos y positivos de salud infantil inéditos, de la población infantil habanera. Se encontraron diferencias entre áreas de desarrollo con relación a distintos estudios anteriores. Predominaron los coeficientes de regresión positivos de la TDP y mayor frecuencia de adelantos del IDP de los niños cubanos, al compararlos con otras poblaciones.
Conclusiones: La TDP y el IDP son indicadores que permiten evaluar el DPM a nivel poblacional. El predominio de tendencias positivas en el desarrollo de los niños estudiados así como de mayores porcentajes de adelantos en el IDP respecto a las poblaciones con las que se comparó, es coherente con la prioridad política y el sustento financiero que el Estado cubano brinda a la atención infantil.

-Palabras claves: Desarrollo psicomotor, niños, indicador, salud, infantil

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Contexto: La Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA) es una enfermedad neurodegenerativa, de curso fatal, en la que se afectan las neuronas motoras a diferentes niveles. Sus principales síntomas incluyen la atrofia muscular, trastorno de la deglución, del habla, discapacidad y encamamiento. Los nuevos métodos de procesamiento han sugerido perdida de sustancia gris y sustancia blanca, así como disfunción en diferentes estructuras cerebrales.
Objetivo: Describir los cambios anatómicos y funcionales que se producen en el cerebro de un grupo de pacientes con ELA a través de técnicas de post-procesamiento de imágenes de resonancia magnética (IRM) y de electroencefalograma (EEG).
Material y Método: Se evaluaron treinta adultos con diagnóstico de ELA esporádica y treinta sujetos sanos pareados en edad y sexo con los enfermos. A los mismos se les realizó IRM de alto campo, así como EEG de 19 canales. A ambas técnicas se le aplicaron métodos de post-procesamiento, que incluyeron: tractografía, morfometría basada en vóxels (MBV) y determinación del grosor cortical en el caso de la IRM; aplicación de la escala semi-cuantitativa GTE, medidas de banda estrecha (poder espectral por bandas de frecuencia), de banda ancha (poder absoluto, poder relativo, frecuencia media), determinación de fuentes de corriente (tomografía eléctrica cerebral) y conectividad funcional. Además se le realizó estudio genético para determinar la presencia de mutaciones (pendiente a resultado).
Resultados principales: En el grupo de pacientes la tractografía reveló disminución del volumen del tracto cortico-espinal y de la radiación óptica (p=0.03), (p=0.04). La MBV reveló atrofia cerebral en áreas corticales, cerebelo, tronco encefálico, núcleos de sustancia gris profundos de la base, cuerpo calloso, tracto cortico-espinal, cápsula interna y externa, fascículo longitudinal medio e inferior y en la radiación óptica. El análisis del grosor cortical mostró disminución del mismo en el giro pre-central y en áreas parietales posteriores bilaterales (p=0.03). Todo lo cual indica alteraciones anatómicas a nivel de la corteza y de otras estructuras cerebrales.
El análisis cuantitativo del EEG se observó que el grupo de pacientes mostró deterioro de la escala GTE (p=0.00), disminución global del espectro de energía de la banda de frecuencia alfa, incremento energía de las banda delta en regiones centro-temporales, theta en regiones fronto-centro-temporales y beta en regiones centro-parietales. Lo cual indica disfunción en estas áreas.
Estas alteraciones empeoraban a medida que aumentaba el tiempo de evolución de la enfermedad (a partir de los 6 meses) y a medida que se deterioraba la escala clínica ALSFRS (por debajo de los 40 puntos).
Conclusiones: En nuestra serie de pacientes con ELA se demostró alteraciones morfológicas y funcionales en regiones cortico-subcorticales que se incrementan a medida que aumenta el tiempo de evolución de la enfermedad y cuando los aspectos clínicos empeoran y podrían ser tomados como biomarcadores en el diagnóstico y monitoreo de la enfermedad

-Palabras claves: ELA, tractografía, grosor cortical, EEG, conectividad

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-Modalidad: Póster

-Resumen: Contexto: En las patologías neurodegenerativas la edad es el principal factor de riesgo. Cuba es un país con un rápido envejecimiento poblacional, el 18 % de su población supera los 60 años. Los fármacos y las herramientas para el seguimiento de estas afecciones son limitados, por lo que en BioCubafarma se realizan ensayos clínicos de la aplicación de nuevas terapias en estas patologías. Uno de los criterios de evaluación de estos pacientes lo constituyen las neuroimágenes, siendo uno de los problemas a resolver, que no se dispone de un informe radiológico estandarizado que permita realizar adecuadamente la evaluación de la atrofia cerebral.
Objetivo: Homogeneizar y estandarizar los informes de los estudios por imágenes de resonancia magnética para lograr un diagnóstico temprano y un mejor seguimiento de la evolución clínica imagenológica de los pacientes.
Material y Método: Se aplicaron las escalas visuales semicuantitativas para la evaluación de imágenes de sujetos de los ensayos clínicos , ( Escala de atrofia órbito-frontal, del cíngulo anterior, fronto-insular/Cisura de Silvio, atrofia cortical global , escala de Koedman de atrofia parietal con valores de ( 0‐ 3), Escala de atrofia del lóbulo temporal anterior, temporal medial con valores de (0‐ 4), así como la Evaluación de las lesiones vasculares con la escala de Fazekas con valores de ( 0‐ 3). Aplicadas a 189 sujetos participantes en los ensayos clínicos de Alzheimer (n=150) y de proyecto de Ataxia (n=39). En esta se cuantifica la atrofia de seis regiones cerebrales con los grados mencionados anteriormente según corresponda, se sopesan las lesiones vasculares. Si el puntaje es de 2 o superior se considera anormal para menores de 75 años. Si el puntaje es de 3 o superior es anormal con más de 75 años. También se hacen medidas cualitativas lineales de tronco encefálico (mesencéfalo, puente y medula oblongada) y del vermis del cerebelo. Estas medidas se realizan en cortes sagitales y axiales. Se evalúan los diámetros anteroposteriores, verticales y transversales de las estructuras mencionadas anteriormente.
Resultados principales: Con respecto al ensayo clínico de Alzheimer se evaluaron 150 sujetos. De ellos 94 femeninos y 56 masculinos, se encontraron 27 sujetos que no tenían atrofia fuera de los límites para su edad, 123 sujetos patológicos,10 sujetos presentaron atrofia temporal pura probablemente relacionada con Alzheimer, el resto de los sujetos mostraron atrofia combinada. En la aplicación de las escalas relacionadas con lesiones vasculares se encontraron 28 sujetos con infartos, 29 sujetos con microhemorragias y 9 sujetos con ambos tipos de lesiones. En el ensayo clínico de Ataxia se evaluaron 39 sujetos. De ellos 26 femeninos y 13 masculinos. Se encontraron 11 sujetos sanos y 28 sujetos con atrofia a nivel del puente, de la base del puente y de los pedúnculos cerebelosos medios y del vermis, de ellos 6 eran pre- sintomáticos teniendo mayor afectación en el diámetro anteroposterior de la protuberancia con 4 sujetos afectados. Se evaluaron 22 sintomáticos, detectando mayor afectación del diámetro anteroposterior de la base del puente y el diámetro anteroposterior de la protuberancia con 22 sujetos seguido del diámetro vertical de la protuberancia con 21 sujetos afectados.
Conclusiones: Se obtuvo un informe estandarizado y cuantitativo para la evaluación de la atrofia en imágenes por resonancia.

-Palabras claves: enfermedades neurodegenerativas, resonancia magnética, escalas, diagnostico

-Autores:

-Modalidad: Póster